Cách sử dụng bình nuôi cấy tế bào để phát hiện khuẩn lạc E. coli

Wed May 18 13:49:46 CST 2022

Vi khuẩn Coliform dùng để chỉ một nhóm vi khuẩn gram âm không phải trực khuẩn có thể lên men đường lactose, tạo ra axit và khí, hiếu khí và kỵ khí. Trong các ứng dụng thực tế, nó thường được sử dụng như một chất chỉ thị xem thực phẩm có bị ô nhiễm bởi phân hay không. Trong số tất cả các phương pháp phát hiện, việc sử dụng để phát hiện là phương pháp được sử dụng phổ biến hơn. Các bước thao tác như sau: Bình nuôi cấy tế bào

1. Lấy mẫu và pha loãng

(1) Theo phương pháp vô trùng, cho 25g (hoặc 25mL) mẫu thử vào bình nuôi cấy tế bào chứa 225mL nước vô trùng (số lượng hạt thủy tinh thích hợp trong bình) hoặc cối đã khử trùng và lắc kỹ. Hoặc xay để tạo độ loãng đồng nhất 1:10. Tốt nhất nên sử dụng máy đồng nhất vô trùng cho các mẫu rắn và ly tâm với tốc độ 8000 10000r / phút trong 1 phút để tạo độ pha loãng 1:10.

(2) Sử dụng ống hút vô trùng 1mL để hút 1Ml pha loãng 1:10, đổ vào ống nghiệm chứa 9mL nước vô trùng, lắc và lắc đều để tạo độ pha loãng 1: 100, thay bằng ống hút 1mL vô trùng, ấn Các thao tác trên thực hiện liên tiếp 10 lần pha loãng nối tiếp. .

(3) Theo yêu cầu vệ sinh thực phẩm hoặc ước tính độ nhiễm bẩn của mẫu thử, chọn ba độ pha loãng và cấy vào 3 ống cho mỗi độ pha loãng. Nó cũng có thể được cấy trực tiếp vào mẫu.

2. Thử nghiệm lên men ban đầu của lactose

Đây thường được gọi là thử nghiệm giả định. Mục đích của nó là để kiểm tra mẫu vi khuẩn lên men lactose để tạo ra khí. Mẫu cần kiểm tra được cấy vào ống lên men muối mật lactose, ống lên men muối mật kép lactose được sử dụng đối với loại cấy trên 1 mL; ống lên men muối mật lactose đơn được sử dụng cho 1 mL và dưới 1 mL. Cấy 3 ống cho mỗi độ pha loãng và đặt chúng vào tủ ấm 36 ± 1 ℃ trong 24 ± 2 giờ. Nếu tất cả các ống lên men muối mật lactose không tạo ra khí, nó có thể được báo cáo là âm tính với vi khuẩn coliform. Nếu có khí sinh ra, hãy làm theo quy trình dưới đây.

3. Cấy phân tách

Các ống lên men sinh khí được đánh sọc và cấy trên đĩa thạch xanh eosin methylen, và nuôi cấy trong tủ ấm ở 36 ± 1 ° C trong 18-24 giờ. Sau đó, hình thái khuẩn lạc được quan sát và nhuộm Gram, kiểm tra bằng kính hiển vi và thử nghiệm lên men lại.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. Thử nghiệm lên men kép lactose

Cái gọi là thử nghiệm xác nhận, mục đích là để chứng minh rằng vi khuẩn gram âm không phải trực khuẩn phân lập từ ống nghiệm dương tính trong thử nghiệm lên men lactose ban đầu thực sự có thể lên men lactose để tạo ra khí. Trên môi trường EMB chọn lọc nêu trên, chọn 1 đến 2 khuẩn lạc coliform khả nghi để nhuộm Gram, đồng thời cấy vào các ống lên men lactoza rồi đặt vào tủ ấm 36 ± l ° C trong 24 ± 2 giờ để quan sát khí. sản lượng. . Trường hợp ống lên men lactose tạo ra khí và vết gram âm tính, vi khuẩn không có Bacillus được báo cáo là dương tính với coliform; Trường hợp ống lên men lactose không sinh khí hoặc vết nhiễm khuẩn gram dương tính là âm tính với coliform.

Trên đây là phương pháp vận hành sử dụng bình nuôi cấy tế bào để phát hiện các chỉ số nhóm E. coli. Escherichia coli là một chỉ số quan trọng phản ánh thực phẩm có bị nhiễm khuẩn hay không. Nắm vững phương pháp phát hiện là kỹ năng cơ bản mà mọi nhân viên kiểm tra thực phẩm cần có.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.