English
Nhiễm mycoplasma là một vấn đề rất phổ biến khi nuôi cấy tế bào ở nhà máy tế bào . Không giống như các chất gây ô nhiễm khác, các tế bào nhiễm mycoplasma thường không bị vẩn đục nên rất khó đánh giá bằng mắt thường. Có bốn cách để xác định xem tế bào có bị nhiễm mycoplasma hay không:
1. Nhuộm huỳnh quang DNA
Phương pháp nhuộm huỳnh quang DNA dựa trên nguyên tắc là thuốc nhuộm huỳnh quang Hoechst33258 có thể liên kết với vùng giàu base AT trong DNA của mycoplasma. Các chấm huỳnh quang là DNA mycoplasma giàu AT ở vùng cơ sở.
2. Công nghệ PCR
Các đoạn mồi cụ thể được thiết kế theo trình tự bảo tồn trong hệ gen Mycoplasma, axit nucleic của mẫu cần kiểm tra được khuếch đại và chẩn đoán được thực hiện bằng cách phân tích kích thước của sản phẩm khuếch đại. Công nghệ phát hiện PCR được sử dụng để phát hiện nhiễm mycoplasma, với chu kỳ ngắn, độ nhạy cao, độ đặc hiệu tốt, hoạt động đơn giản và có thể phát hiện một số lượng lớn mẫu cùng một lúc.
3. Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym (ELISA)
ELISA được sử dụng để phát hiện nhiễm mycoplasma, với độ đặc hiệu và độ nhạy tốt, đồng thời có thể hoàn thành việc phát hiện một số lượng lớn mẫu cùng một lúc. Nó có các đặc điểm là phát hiện định tính đơn giản, nhanh chóng và định lượng.
4. Kính hiển vi điện tử
Nói chung, các tế bào trong nhà máy tế bào được nuôi cấy trong 48 đến 72 giờ. Trước khi tế bào gần hợp lưu, tế bào được tiêu hóa bằng trypsin để tạo huyền phù tế bào, cố định, nhúng và cắt lát trước khi quan sát.
Trên đây là bốn phương pháp phát hiện thường được sử dụng khi phát hiện nhiễm mycoplasma trong các nhà máy sản xuất tế bào. Hiện nay, có hơn 20 loại mycoplasma được biết là có thể gây ô nhiễm tế bào, trong đó hơn 95% là mycoplasma ở miệng, vì vậy người thực hiện cần chú ý thao tác vô trùng khi nuôi cấy tế bào.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.