English
Vi khuẩn Lysogenic đề cập đến vi khuẩn có các cánh quạt tích hợp trên nhiễm sắc thể của chúng và có thể phát triển và sinh sản bình thường mà không bị phân ly. Các đại thực khuẩn nhẹ đã được sử dụng rộng rãi trong các lĩnh vực truyền tải, vectơ công nghệ gen và sinh học phân tử. có thể được sử dụng để kiểm tra khả năng sinh ly của vi khuẩn. Phương thức thao tác cụ thể như sau: Bình nuôi cấy tế bào
1. Nuôi cấy vi khuẩn lysogenic: Cấy E. coli 225 (λ) được kích hoạt bởi độ dốc LB vào bình nuôi cấy tế bào 250ml có chứa 20ml dung dịch nuôi cấy LB, nuôi cấy bằng lắc ở 30 ° C trong 16 giờ, sau đó lấy 2ml huyền phù vi khuẩn từ đó và kết nối nó với bình khác Trong bình Erlenmeyer 250ml chứa 20ml canh LB, nuôi cấy với lắc ở 37 ° C trong 2 giờ đến pha logarit.
2. Loại trừ phage tự do: Nếu chủng được thử nghiệm là Bacillus, nó có thể được tạo thành huyền phù bào tử, sau đó xử lý ở 80 ° C trong 10 phút để tiêu diệt phage có thể bị hấp phụ và tự do trên bề mặt của vi khuẩn lysogenic; nếu chủng cần kiểm tra không phải là Bacillus, Sử dụng kháng huyết thanh được chuẩn bị bởi phage hoặc dung dịch natri citrat 0,2% để rửa tế bào lysogen pha log để loại bỏ phage hấp phụ bề mặt và tự do. Sau khi ly tâm ở 4000r / min trong 10 phút, phần nổi phía trên có thể được thêm vi khuẩn chỉ thị nhạy để xác định đĩa hai lớp, được sử dụng để kiểm tra phage tự do của mẫu và phage hấp phụ vi khuẩn lysogenic. Thể thực khuẩn sau khi ly tâm Tế bào được cảm ứng.
3. Cảm ứng vi khuẩn lysogenic: vi khuẩn thu được sau khi ly tâm được rửa hai lần bằng nước muối thường vô trùng và được tạo thành nồng độ cuối cùng là 1011 tế bào / ml bằng nước muối thường hoặc 100mmol / l đệm Tris-HCL (pH7,0) Đối với huyền phù vi khuẩn, thêm Cho 5ml huyền phù vi khuẩn vào mỗi đĩa, chiếu bằng đèn UV 30W ở khoảng cách 30cm trong 30s, thêm ngay 5ml dung dịch nuôi cấy LB nồng độ kép, lắc đều và ủ trong bóng tối 37oC trong 2h.
4. Kiểm tra chủng lysogenic: Thao tác theo phương pháp thạch hai lớp, thêm vài giọt cloroform vào dịch ly giải ở trên, và pha loãng thích hợp bằng phương pháp pha loãng 10 lần. Sau khi chọn ba độ pha loãng của dung dịch, lấy 0,3ml cho mỗi độ pha loãng. Trộn đều với 0,2ml huyền phù vi khuẩn E. coli 226 nhạy cảm với pha logarit, sau đó thêm môi trường bán thể LB đã được đun chảy và làm nguội đến 45 ° C, trộn ngay sau đó đổ lên đĩa môi trường rắn LB. Sau khi đông đặc, 37 Ủ ở ℃ trong 6h và quan sát. Nếu một số lượng lớn mảng xuất hiện trên đĩa nuôi cấy, chứng tỏ chủng được kiểm tra là một lysogen.
Để kiểm tra xem vi khuẩn có tính sinh ly hay không, hãy làm theo các bước trên. Chú ý khâu vô trùng trong quá trình vận hành để tránh thao tác không đúng kỹ thuật ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.