English
Матеріали та методи
3.1. Культивування в збовтаних колбах
Попередні культури клітин суспензії MDCK.SUS2 вирощували в shaker flasks (125 мл полікарбонатні колби Ерленмейера, № 431143, Corning®, Нью-Йорк, Нью-Йорк, США) з робочим об’ємом 50 мл (wv) , в інкубаторі Multitron Pro (Infors HT, Bottmingen, Switzerland) при 37 °C та атмосфері 5% CO2 з частотою струшування 180 об/хв. Клітини пассували кожні 3–4 дні з щільністю висіву 0,5–0,8 × 106 клітин/мл.
IAV A/Puerto Rico/8/34 (H1N1). у прилиплих клітинах MDCK (ECACC № 84121903). Засівний вірус мав титр 1,1 × 109 TCID50/мл.
Клітини культивували в хімічно визначеному середовищі без білків і тваринних компонентів, Smif8 (Smif8 PGD 2×, доповнений 5 мМ глутаміну та 8 mM пірувату), спеціально розробленого для культивування суспензійних клітин MDCK [95].
Експерименти щодо зростання та інфікування для перевірки моделі проводили за допомогою струшувальних колб об’ємом 500 мл (№ 4113-0500, Nalgene™, Thermo Scientific, Waltham, MA, США) з початковим об’ємом культивування 200 мл при 150 об/хв. Було проведено два культивування, одне імітаційне зараження (культивування 1), де клітини росли приблизно 200 год, і одне зараження (культивування 2), де клітини були заражені IAV приблизно через 49 год після інокуляції. Для досягнення синхронного зараження клітинної популяції використовували moi = 10. Через відносно низьку концентрацію клітин під час зараження (2,1 × 106 клітин/мл) та високу використовувану moi не було потреби ні заміни середовища, ні додавання трипсину (для активації вірусу). В обох культиваціях стерильну воду Milli-Q додавали перед відбором проб для компенсації випаровування води (1–2 мл/добу), оскільки експеримент проводили в негідратованому інкубаторі.
Джерело з: https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.