English
Пасаж клітини відноситься до процесу поділу культури на невеликі частини, повторного висіву в іншу культуральну посудину, а потім культивування. Фляги для культури клітин є звичайним витратним матеріалом у процесі пасажування, тож які конкретні етапи пасажування клітини?
1. Вийміть колби для культури клітин з інкубатора, розпиліть 75% спирт на поверхню пляшки за допомогою спиртового балончика та перенесіть на ультрачистий стіл.
2. Відкрийте кришку, обережно аспіруйте старе культуральне середовище, додайте відповідну кількість PBS-буфера, щоб промити 1-2 рази за допомогою піпетки Пастера, і викиньте PBS-буфер.
3. За допомогою піпетки додайте 1-2 мл панкреатину і струсіть «хрестик», щоб панкреатин повністю контактував із клітинами.
4. Перенесіть колбу з культурою клітин з трипсином в інвертований мікроскоп і спостерігайте за перетравленням клітин під мікроскопом. Коли клітини стають круглими і відпадають у великій кількості, приготуйтеся до припинення травлення. Збризніть поверхню пляшки 75% спиртом і перенесіть її в Super Net Taiwan.
5. За допомогою піпетки (або піпетки Пастера) додайте рівну кількість середовища, що містить сироватку, щоб припинити травлення. Ретельно внесіть піпеткою, щоб клітини повністю відпали.
6. Перенесіть змішану рідину з пляшки в центрифужну пробірку, збалансуйте її та центрифугуйте приблизно 5 хвилин.
7. Після центрифугування розпиліть поверхню центрифужної пробірки з балончика зі спиртом, перенесіть її на ультрачистий стіл, відкрийте кришку та вилийте супернатант у ємність для відходів.
8. Додайте відповідний об’єм середовища, що містить сироватку, і обережно піпеткою піпеткою або піпеткою Пастера, щоб зробити суспензію клітин.
9. Розділіть суспензію клітин на 2 (або більше) чисті стерильні культуральні колби, додайте відповідну кількість культурального середовища та закрийте кришку.
10. Помістіть аликвотну культуральну колбу на підставку перевернутого мікроскопа та спостерігайте за станом клітин. Кількість клітин має бути гарантована. Занадто мала кількість вплине на зростання.
11. Позначте пляшку, щоб вказати час проходження, тип осередку, оператора та іншу інформацію. Перед тим, як помістити його в інкубатор, знову збризніть поверхню корпусу пляшки спиртом, очистіть операційний стіл, протріть поверхню ультрачистого столу 75% спиртом, очистіть від відпрацьованої рідини та сміття.
The вище наведено конкретний процес використання колби для культури клітин для проходження клітини. Зауважте, що ви повинні носити стерильний одяг, стерильні рукавички та маски під час роботи, а також звертати увагу на асептичні дії протягом усього процесу, щоб уникнути забруднення клітин.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.