English
Під субкультурою розуміється процес поділу культури на дрібні частини, повторного посіву їх в іншу культуральну посудину (пляшку), а потім культивування. Фляги для клітинної культури – зазвичай використовуються витратні матеріали при культивуванні клітин. Отже, як підкультивувати клітини в колбі?
Як правило, клітини в колбах для культури клітин виростають у щільний моношар і в основному насичуються. Для того, щоб клітини могли продовжувати відтворюватися і розширювати кількість клітин, необхідно проводити операції проходження. Підвішені клітини можна відокремити безпосередньо, тоді як адгезивні клітини необхідно перетравити, перш ніж їх можна буде розділити. Як правило, протеолітичні ферменти (наприклад, трипсин) використовуються для перетравлення прилиплих клітин до окремих клітин. Для поліпшення травлення також можна додати етилендіамінтетраоцтову кислоту (EDTA). Спостерігайте за клітинами, поки клітини не стануть круглими і не від’єднаються від стінки пляшки. Цей процес зазвичай займає 5-15 хвилин. Щоб уникнути згустків клітин, не торкайтеся колби для культури клітин під час процесу перетравлення клітин.
Для особливо важко перетравлюваних клітин ви можете додати розчин для перетравлення трипсину EDTA і помістити клітини при 37°C, щоб полегшують травлення. Після того як клітини будуть відокремлені від стінки пляшки, негайно додайте повне середовище, що містить сироватку, щоб зупинити травлення. Деякі білки в сироватці можуть пригнічувати роботу підшлункової залози. Активність ферментів. Загалом центрифугування не потрібне. Якщо клітинам потрібне середовище без сироватки або з низьким вмістом сироватки, центрифугуйте при 125000g протягом 5 хвилин, потім видаліть середовище, яке було припинено, додайте відповідне нове середовище та обережно перемішайте клітини перед пересіюванням.
Співвідношення пасажу клітин зазвичай становить 1:2. -1:20, залежно від типу осередку. У процесі пасажу трипсин пошкоджує клітинну мембрану деяких клітин. Ви можете використовувати скребок для клітин, щоб обережно зішкребти клітини, додати відповідну кількість середовища, обережно піпеткою перемішати клітини та перенести їх у нову культуральну колбу.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.