Як виміряти кількість живих клітин на клітинній фабриці

Wed May 18 13:59:19 CST 2022

— це одношарова або багатошарова структура витратних матеріалів для культури клітин. Під час процесу культури клітин нам потрібно вчасно зрозуміти стан росту клітин, перш ніж перейти до наступного кроку. Кількість життєздатних клітин можна визначити за допомогою фарбування трипановим синім. Конкретний метод роботи такий:1. Для адгезивних клітин аспіруйте середовище, додайте розчин для травлення та переваріть в інкубаторі протягом відповідного часу. Після того, як клітини стали круглими, травлення припиняли додаванням такого ж або більшого об’єму середовища, ніж об’єм дигестату. Після центрифугування суспензію клітин готують із культуральним середовищем;cell factory

2. Візьміть 0,5 мл розчину трипанового синього, 0,3 мл PBS і 0,2 мл суспензії клітин і добре перемішайте. Потім суміш залишають на 1-2 хв. Використовуйте капілярну піпетку або маленький наконечник піпетки на 10 мкл, щоб набрати невелику кількість суміші та ввести її в гемоцитометр;

3. Підрахуйте щонайменше 1000 клітин і підрахуйте кількість забарвлених клітин;

4. Промийте лічильник і покривне скельце надчистою водою та 75% етанолом;

5. Нормальні клітини не фарбуються, тільки після того, як клітини відмирають, проникність клітинної мембрани стає більшою, трипановий синій проникає в клітини, і клітини виглядають синіми. Суміш не слід тримати занадто довго, інакше звичайні живі клітини також поглинуть барвник, що вплине на точність підрахунку;

6. Життєздатність клітин (%) = (загальна кількість клітин - кількість забарвлених клітин)/загальна кількість клітин*100;

7. Як і метод підрахунку клітин, фарбування трипановим синім має велику похибку. Він може виявити лише ранній рівень апоптозу і не може показати різницю між контрольною та експериментальною групою.

У процесі культивування клітин на клітинній фабриці завжди є клітини, які гинуть із різних причин. Оволодіння кількістю живих клітин і життєздатністю клітин є ключовою операцією в експериментах з культурою клітин і ефективним способом забезпечення ходу експерименту.

In the process of culturing cells in a cell factory, there are always some cells that die due to various reasons. Mastering the number of living cells and cell viability is a key operation in cell culture experiments and an effective way to ensure the progress of the experiment.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.