English
Зараження мікоплазмою є дуже поширеною проблемою при культивуванні клітин в cell factories. На відміну від інших забруднень, клітини, заражені мікоплазмою, зазвичай не мутніють, тому про це важко судити неозброєним оком. Є чотири способи визначити, чи клітини забруднені мікоплазмою:
1. Флуоресцентне фарбування ДНК
Метод флуоресцентного фарбування ДНК заснований на тому принципі, що флуоресцентний барвник Hoechst33258 може зв’язуватися з багатим на базу AT ділянкою в ДНК мікоплазми. Флуоресцентні точки – це ДНК мікоплазми, багата ділянками АТ-основ.
2. Технологія ПЛР
Специфічні праймери розроблені відповідно до консервативних послідовностей у геномі Mycoplasma, нуклеїнова кислота зразка, що підлягає тестуванню, ампліфікується, а діагноз встановлюється шляхом аналізу розміру ампліфікованого продукту. Технологія ПЛР-виявлення використовується для виявлення зараження мікоплазмою, з коротким циклом, високою чутливістю, хорошою специфічністю, простою операцією та може виявляти велику кількість зразків за один раз.
3. Імуноферментний аналіз (ІФА)
ІФА використовується для виявлення забруднення мікоплазмою з хорошою специфічністю та чутливістю і може завершити виявлення великої кількості зразків за один раз. Він має характеристики простого, швидкого та кількісного якісного виявлення.
4. Електронний мікроскоп
Як правило, клітини на клітинних фабриках культивують від 48 до 72 годин. До того, як клітини майже злилися, клітини перетравлюються трипсином для отримання клітинної суспензії, фіксують, вбудовують і нарізають перед спостереженням.
Вище наведено чотири широко використовувані методи виявлення при виявленні забруднення мікоплазмою на клітинних фабриках. В даний час відомо більше 20 видів мікоплазми, які забруднюють клітини, з яких понад 95% є мікоплазмами ротової порожнини, тому операторам слід звертати увагу на асептичну роботу при культивуванні клітин.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.