English
Çeşitli hücreler kültürlenirken hücre kültürü şişeleri, daha sık kullanılan bir tür hücre kültürü sarf malzemeleridir. Çoğunlukla yapışık hücrelerin kültürü için kullanılırlar ve spesifikasyonlar 25ml ile 225ml arasında değişir. Hamster böbrek hücre kültürü ortamı bu sarf malzemesini kullanacaktır ve kültürünün spesifik adımları aşağıdaki gibidir:
1. Hücre kültürü için hazırlık çalışması:
1) MEM ortamını hazırlayın; yüksek kaliteli fetal sığır serumu, %10; çift antikor %1.
2) Kültür koşulları: Gaz fazı: hava, %95; karbondioksit, %5. Sıcaklık: 37 santigrat derece, inkübatör nemi %70-80.
3) Dondurucu solüsyon: %90 serum, %10 DMSO, kullanıma hazır.
2. Hücre işleme:
1) Kriyoprezerve edilmiş hücrelerin geri kazanılması: 1 mL hücre süspansiyonu içeren kriyoprezerve tüpü 37°C'lik bir su banyosunda hızla çalkalayın ve eritin, 4-6 mL tam besiyeri içeren bir santrifüj tüpüne ekleyin ve karıştırın kuyu. 3-5 dakika 1000 RPM'de santrifüjleyin, süpernatantı atın ve hücreleri tam ortam içinde yeniden süspanse edin. Hücre süspansiyonu daha sonra 6-8 ml tam ortam içeren bir hücre kültürü şişesine ilave edildi ve gece boyunca 37°C'de kültürlendi. Hücre büyümesi ve hücre yoğunluğu ertesi gün bir mikroskop altında gözlemlendi.2) Hücre geçişi: Hücre yoğunluğu %80-90'a ulaşırsa alt kültürlenebilir. sonraki deneyler için kültürün ilk 3 geçişinde bir grup hücre tohumunun dondurulması önerilir.
Yukarıdakiler, hücre kültürü şişelerinde hamster böbrek hücrelerinin kültürlenmesi için özel adımlardır. Ek olarak, hücreler dondurularak saklandığında, sindirilmiş hücreleri hücre geçişi işlemine göre bir santrifüj tüpüne toplayın ve hücrelerin dondurarak saklama yoğunluğunu belirlemek için bunları saymak için bir hemositometre kullanın. Genel hücrelerin tavsiye edilen donma yoğunluğu 1×106~1×107 canlı hücre/ml'dir.
3) Cryopreservation of cells: After receiving the cells, it is recommended to freeze a batch of cell seeds in the first 3 passages of culture for subsequent experiments.
The above are the specific steps for culturing hamster kidney cells in cell culture flasks. In addition, when cells are cryopreserved, collect the digested cells into a centrifuge tube according to the process of cell passage, and use a hemocytometer to count them to determine the cryopreservation density of cells. The recommended freezing density of general cells is 1×106~1×107 viable cells/ml.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.