Hücre geçişi, kültürü küçük parçalara bölme, başka bir kültür kabında yeniden tohumlama ve ardından kültürleme sürecini ifade eder. Hücre kültürü şişeleri geçiş sürecinde yaygın bir sarf malzemesidir, peki hücre geçişinin belirli adımları nelerdir?
1. Hücre kültürü şişelerini inkübatörden çıkarın, bir alkol sprey kutusu ile şişenin yüzeyine %75 alkol püskürtün ve ultra temiz masaya aktarın.
2. Kapağı açın, eski kültür ortamını nazikçe aspire edin, Pasteur pipeti ile 1-2 kez yıkamak için uygun miktarda PBS tamponu ekleyin ve PBS tamponunu atın.
3. 1-2 ml pankreatin eklemek için bir pipet kullanın ve pankreatinin hücrelerle tamamen temas etmesini sağlamak için "çapraz"ı sallayın.
4. Tripsinli hücre kültürü şişesini ters mikroskop aşamasına aktarın ve mikroskop altında hücre sindirimini gözlemleyin. Hücreler yuvarlaklaştığında ve büyük miktarlarda düştüğünde, sindirimi sonlandırmaya hazırlanın. Şişenin yüzeyine %75 alkol püskürtün ve süper Net Taiwan'a aktarın.
5. Sindirimi sonlandırmak için eşit miktarda serum içeren ortam eklemek için bir pipet (veya Pasteur pipeti) kullanın. Hücrelerin tamamen düşmesini sağlamak için iyice pipetleyin.
6. Şişedeki karıştırılmış sıvıyı bir santrifüj tüpüne aktarın, dengeleyin ve yaklaşık 5 dakika santrifüjleyin.
7. Santrifüjden sonra, santrifüj tüpünün yüzeyine bir alkol sprey kutusu püskürtün, ultra temiz masaya aktarın, kapağı açın ve süpernatantı atık tankına dökün.
8. Uygun hacimde serum içeren ortam ekleyin ve bir hücre süspansiyonu yapmak için bir pipet veya Pasteur pipeti ile hafifçe pipetleyin.
9. Hücre süspansiyonunu 2 (veya daha fazla) temiz steril kültür şişesine bölün, uygun miktarda kültür ortamı ekleyin ve kapağı kapatın.
10. Alikot kültür şişesini ters mikroskop sahnesine yerleştirin ve hücre durumunu gözlemleyin. Hücre sayısı garanti edilmelidir. Çok küçük sayı büyümeyi etkileyecektir.
11. Geçiş süresini, hücre tipini, operatörü ve diğer bilgileri belirtmek için şişeyi işaretleyin. İnkübatöre koymadan önce, şişe gövdesinin yüzeyine tekrar alkol püskürtün, ameliyat masasını temizleyin, ultra temiz masanın yüzeyini %75 alkol ile silin ve atık sıvı ve çöpleri temizleyin.
The yukarıdaki hücre geçişi için hücre kültürü şişeleri kullanmanın özel sürecidir. İşlem sırasında steril giysiler, steril eldivenler ve maskeler takmanız ve işlem boyunca hücre kontaminasyonunu önlemek için aseptik işlemlere dikkat etmeniz gerektiğini unutmayın.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.