English
Alt kültür, kültürün küçük parçalara bölünmesi, başka bir kültür kabına (şişe) yeniden aşılanması ve ardından kültürlenmesi sürecini ifade eder. Hücre kültürü şişeleri, hücreleri yetiştirirken yaygın olarak kullanılan sarf malzemeleridir. Peki, şişedeki hücreler nasıl alt kültürlenir?
Genel olarak, hücre kültürü şişelerindeki hücreler yoğun bir tek tabaka halinde büyür ve temelde doymuştur. Hücrelerin çoğalmaya devam edebilmesi ve hücre sayısını artırabilmesi için geçiş işlemlerinin yapılması gerekir. Askıya alınmış hücreler doğrudan ayrılabilirken, yapışık hücrelerin ayrılmadan önce sindirilmesi gerekir. Genel olarak, proteolitik enzimler (tripsin gibi), yapışık hücreleri tek hücrelere sindirmek için kullanılır. Sindirimi iyileştirmek için etilendiamintetraasetik asit (EDTA) da eklenebilir. Hücreler yuvarlak hale gelene ve şişe duvarından ayrılana kadar hücreleri gözlemleyin. Bu işlem genellikle 5-15 dakika sürer. Hücre kümelerinden kaçınmak için, hücreleri sindirme işlemi sırasında hücre kültürü şişelerine dokunmayın.
Özellikle sindirimi zor olan hücreler için, tripsin EDTA sindirim solüsyonu ekleyebilir ve hücreleri 37°C'ye yerleştirebilirsiniz. sindirimi kolaylaştırır. Hücreler şişe duvarından ayrıldıktan sonra, sindirimi durdurmak için hemen tam bir ortam içeren serum ekleyin. Serumdaki bazı proteinler pankreası inhibe edebilir. Enzim aktivitesi. Genel olarak, santrifüjleme gerekli değildir. Hücreler serumsuz veya düşük serumlu ortam gerektiriyorsa, 125000 g'de 5 dakika santrifüjleyin, ardından durdurulan ortamı atın, uygun yeni ortam ekleyin ve alt kültürden önce hücreleri nazikçe karıştırın.
Hücre geçiş oranı genellikle 1:2'dir. -1:20, hücre tipine bağlı olarak. Geçiş sürecinde tripsin, bazı hücrelerin hücre zarına zarar verir. Hücreleri nazikçe kazımak için bir hücre kazıyıcı kullanabilir, uygun miktarda besiyeri ekleyebilir, hücreleri karıştırmak için hafifçe pipetleyebilir ve bunları yeni bir kültür şişesine aktarabilirsiniz.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.