English
Mikoplazma kontaminasyonu, hücre fabrikaları hücre kültürü yapılırken çok yaygın bir sorundur. Diğer kontaminasyonların aksine, mikoplazma ile kontamine hücreler genellikle bulanıklaşmazlar, bu nedenle çıplak gözle karar vermek zordur. Hücrelerin mikoplazma ile kontamine olup olmadığını belirlemenin dört yolu vardır:
1. DNA floresan boyama
DNA floresan boyama yöntemi, floresan boya Hoechst33258'in mikoplazma DNA'sındaki AT baz açısından zengin bölgeye bağlanabilmesi ilkesine dayanır. Floresan noktalar, AT baz bölgelerinden zengin mikoplazma DNA'sıdır.
2. PCR teknolojisi
Spesifik primerler, Mycoplasma genomundaki korunan sekanslara göre tasarlanır, test edilecek örneğin nükleik asidi amplifiye edilir ve amplifiye ürünün boyutu analiz edilerek teşhis yapılır. PCR saptama teknolojisi, kısa döngü, yüksek hassasiyet, iyi özgüllük, basit işlem ile mikoplazma kontaminasyonunun saptanması için kullanılır ve aynı anda çok sayıda numuneyi algılayabilir.
3. Enzim bağlantılı immünosorbent tahlili (ELISA)
ELISA, iyi bir özgüllük ve hassasiyetle mikoplazma kontaminasyonunun saptanmasında kullanılır ve bir kerede çok sayıda örneğin saptanmasını tamamlayabilir. Basit, hızlı ve nicel nitel algılama özelliklerine sahiptir.
4. Elektron mikroskobu
Genel olarak, hücre fabrikalarındaki hücreler 48 ila 72 saat boyunca kültürlenir. Hücreler neredeyse birleşmeden önce, hücreler bir hücre süspansiyonu yapmak için tripsin ile sindirilir, sabitlenir, gömülür ve gözlemden önce dilimlenir. Yukarıdakiler, hücre fabrikalarında mikoplazma kontaminasyonunu tespit ederken yaygın olarak kullanılan dört tespit yöntemidir. Şu anda, hücreleri kontamine ettiği bilinen 20'den fazla mikoplazma türü vardır ve bunların %95'inden fazlası oral mikoplazmadır, bu nedenle operatörler hücre kültürü yaparken aseptik işleme dikkat etmelidir.
The above are four commonly used detection methods when detecting mycoplasma contamination in cell factories. At present, there are more than 20 kinds of mycoplasma known to contaminate cells, of which more than 95% are oral mycoplasma, so operators should pay attention to aseptic operation when culturing cells.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.