1. Orijinal kültür ortamını hücrelerle dolu hücre kültürü şişesine atın.farklı şekillere göre düz boyunlu, tortikolisli, açılı boyunlu, üçgen, dikdörtgen vb. Spesifikasyonlar 25ml, 75ml, 175ml ve 250ml'dir. Daha küçük boyutlar çoğunlukla hücre geçişi, hücrelerin korunması ve deneyler için hücrelerin sağlanması vb. için kullanılır. doymuş. Hücrelerin büyümeye devam edebilmesi ve hücre sayısının artması için alt kültürlenmesi (yeniden kültürlenmesi) gerekir. Alt kültür aynı zamanda hücre türlerini korumanın bir yoludur. Aynı zamanda, kültürlenmiş hücreler kullanılarak çeşitli deneyler için gerekli bir işlemdir. Askıya alınmış hücreler doğrudan ayrılabilirken, yapışık hücrelerin ayrılmadan önce sindirilmesi gerekir. Belirli adımlar aşağıdaki gibidir:
2. 0,5-1 ml %0,25 pankreatin solüsyonu ekleyin, böylece şişenin altındaki hücreler solüsyona daldırılır.
3. Şişenin üzerine lastik bir tıpa koyun ve hücreleri gözlemlemek için ters çevrilmiş bir mikroskop altına yerleştirin. Zaman geçtikçe, orijinal yapışık hücreler kademeli olarak yuvarlak olma eğilimindeydi ve hücreler henüz yüzmediğinde pankreatin atıldı ve sindirimi sonlandırmak için 10 ml kültür ortamı eklendi. Sindirim gözlemi çıplak gözle de yapılabilir. Şişenin dibi beyaz göründüğünde ve ince iğne delikleri göründüğünde sindirim sonlandırılabilir. Genel olarak, oda sıcaklığında sindirme süresi yaklaşık 1-3 dakikadır.
4. Yapışkan hücreleri bir süspansiyona üflemek için bir pipet kullanın, bunları iki ila üç şişeye bölün, kültür solüsyonunu kauçuk bir tıpa ile tıkayın ve kültürlemeye devam etmek için 37°C'ye yerleştirin. Ertesi gün yapışık büyümeyi gözlemleyin.
Yukarıdaki hücre geçişinde
uygulamasıdır. Sindirim solüsyonunun hazırlama yöntemi aşağıdaki gibidir: 0.25 g tripsin tartın (aktivite 1:250), eritmek için 100ml Ca2+, Mg2+ içermeyen Hank solüsyonunu ekleyin, filtre edin Filtreleyerek sterilize edin, 4°C'de saklayın ve 37°C'de saklayın Kullanmadan önce °C. Nihai konsantrasyonun %0.02'ye ulaşmasını sağlamak için pankreatin solüsyonuna EDTA da eklenebilir.
hücre kültürü şişelericell culture flasks in cell passaging. The preparation method of digestion solution is as follows: Weigh 0.25g trypsin (activity 1:250), add 100ml Ca2+, Mg2+-free Hank’s solution to dissolve, filter Sterilize by filtration, store at 4°C, and return to temperature at 37°C before use. EDTA can also be added to the pancreatin solution to make the final concentration reach 0.02%.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.