ขั้นตอนเฉพาะสำหรับการปลูกเซลล์ไตของหนูแฮมสเตอร์ในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์

เมื่อทำการเพาะเลี้ยงเซลล์ต่างๆ cell culture flasks เป็นวัสดุสิ้นเปลืองในการเพาะเลี้ยงเซลล์ชนิดหนึ่งที่ใช้บ่อยกว่า ส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ยึดเกาะ และข้อกำหนดมีตั้งแต่ 25 มล. ถึง 225 มล. สื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ไตของหนูแฮมสเตอร์จะใช้วัสดุสิ้นเปลืองนี้ และขั้นตอนเฉพาะของการเพาะเลี้ยงเซลล์มีดังนี้:

1 งานเตรียมการสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์:

1) เตรียมสื่อ MEM; ซีรั่มวัวในครรภ์คุณภาพสูง 10%; แอนติบอดีคู่ 1%.

2) สภาวะการเพาะเลี้ยง: เฟสของแก๊ส: อากาศ, 95%; คาร์บอนไดออกไซด์ 5% อุณหภูมิ: 37 องศาเซลเซียส, ความชื้นในตู้ฟักไข่ 70%-80%.

3) สารละลายสำหรับแช่แข็ง: เซรั่ม 90%, 10% DMSO, พร้อมใช้งาน.

2. การประมวลผลของเซลล์:

1) การฟื้นตัวของเซลล์ที่เก็บรักษาด้วยความเย็น: เขย่าและละลายหลอดที่แช่เย็นด้วยความเย็นที่มีสารแขวนลอยเซลล์ 1 มล. ในอ่างน้ำ 37°C อย่างรวดเร็ว เติมลงในหลอดสำหรับการปั่นแยกที่มีสื่อสมบูรณ์ 4-6 มล. แล้วผสม ดี. ปั่นแยกที่ 1000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 3-5 นาที ทิ้ง supernatant และแขวนเซลล์ใหม่ในตัวกลางที่สมบูรณ์ จากนั้น สารแขวนลอยของเซลล์ถูกเติมไปยังขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ประกอบด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อที่สมบูรณ์ 6-8 มล. และเพาะเลี้ยงที่ 37°ซ ค้างคืน การเจริญเติบโตของเซลล์และความหนาแน่นของเซลล์ถูกสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์ในวันถัดไป

2) ทางเดินของเซลล์: หากความหนาแน่นของเซลล์ถึง 80% -90% ก็สามารถเพาะเลี้ยงย่อยได้

3) การเก็บรักษาเซลล์ด้วยความเย็น: หลังจากได้รับ เซลล์ ขอแนะนำให้แช่แข็งเมล็ดเซลล์จำนวนหนึ่งใน 3 ทางเดินแรกของการเพาะเลี้ยงสำหรับการทดลองที่ตามมา

ข้างต้นเป็นขั้นตอนเฉพาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ไตของหนูแฮมสเตอร์ในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ นอกจากนี้ เมื่อเซลล์ถูกแช่เย็นด้วยความเย็น ให้รวบรวมเซลล์ที่ย่อยแล้วลงในหลอดหมุนเหวี่ยงตามกระบวนการผ่านของเซลล์ และใช้ฮีโมไซโตมิเตอร์เพื่อนับเซลล์เพื่อกำหนดความหนาแน่นของการเก็บรักษาด้วยความเย็นของเซลล์ ความหนาแน่นของการแช่แข็งที่แนะนำของเซลล์ทั่วไปคือ 1×106~1×107 เซลล์ที่มีชีวิต/มล.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.