วิธีถ่ายโอนเซลล์ที่เก็บรักษาด้วยความเย็นไปยังขวดเพาะเลี้ยงเซลล์

การเก็บรักษาด้วยความเย็นของเซลล์เป็นเทคนิคที่ทำให้เซลล์อยู่ในสภาพแวดล้อมที่มีอุณหภูมิต่ำ เพื่อลดการเผาผลาญของเซลล์เพื่อการเก็บรักษาในระยะยาว นอกจากการปกป้องเซลล์แล้ว เทคโนโลยีนี้มักใช้ในการซื้อ ให้ของขวัญ แลกเปลี่ยน และขนส่งเซลล์บางชนิด ดังนั้น เราจะถ่ายโอนเซลล์ที่เก็บรักษาด้วยการแช่แข็งไปยัง cell culture flasks?

เซลล์ที่แช่แข็งจะต้องได้รับการช่วยชีวิตก่อนจึงจะสามารถดำเนินการต่อไปได้ การฟื้นคืนชีพของเซลล์ควรเป็นไปอย่างรวดเร็ว เพื่อให้สามารถคงสภาพความเป็นอยู่ของเซลล์ได้ดี สามารถดำเนินการได้ดังนี้:

1. หลังจากได้รับเซลล์แล้ว ให้ตรวจสอบว่าบรรจุภัณฑ์ด้านนอกนั้นสมบูรณ์หรือไม่ เปิดบรรจุภัณฑ์ด้านนอกและนำเซลล์ที่เก็บไว้ในน้ำแข็งแห้งออกมา;

2. ตรวจสอบว่าท่อเก็บความเย็นเสียหายหรือไม่ เนื้อหาละลายหรือไม่ และใส่ท่อเก็บความเย็นที่ถอดออกอย่างรวดเร็วในอ่างน้ำ 37℃ เพื่อละลาย;

3. หลอดเก็บรักษาด้วยความเย็นถูกฆ่าเชื้อด้วยแอลกอฮอล์ 75% และวางไว้ในตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพ;

4. เติมสื่อสมบูรณ์ขนาด 5 มล. ลงในหลอดสำหรับการปั่นแยกขนาด 15 มล. สำหรับใช้;

5 เพิ่มสารแขวนลอยของเซลล์ในหลอดเก็บรักษาด้วยการแช่แข็งไปยังสื่อที่เตรียมไว้แล้วผสมเบาๆ;

6 ใส่หลอด centrifuge ขนาด 15 มล. ลงในเครื่อง centrifuge และ centrifuge ที่ความเร็ว 1000rpm/นาที (ประมาณ 200g) เป็นเวลา 3-5 นาที;

7 เติมขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ขนาด 5 มล. ถึง 25 มล. เพื่อใช้;

8 นำเซลล์ที่หมุนเหวี่ยงออก ฆ่าเชื้อด้วยแอลกอฮอล์ และเก็บไว้ในตู้ที่ปลอดภัย;

9. ค่อยๆ ดูด supernatant ของเซลล์ที่ถูกเหวี่ยงออกอย่างเบามือ เติมตัวกลางที่สมบูรณ์ 1 มล. เพื่อแขวนเซลล์อีกครั้ง;

10 เพิ่มเซลล์ที่ถูกแขวนลอยใหม่ลงในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เตรียมไว้และผสมเบา ๆ;

11. สังเกตสถานะและความหนาแน่นของเซลล์ที่เพาะเชื้อภายใต้กล้องจุลทรรศน์ และวางขวดเพาะเชื้อในตู้ฟักที่อุณหภูมิ 37°C สำหรับการเพาะเลี้ยง

ในกระบวนการกู้คืนเซลล์ การหลอมละลายอย่างรวดเร็วสามารถรับประกันได้ว่าผลึกนอกเซลล์จะละลายในระยะเวลาอันสั้น ของเวลาและหลีกเลี่ยงความเสียหายต่อเซลล์เนื่องจากการละลายช้าที่ทำให้น้ำซึมเข้าไปในเซลล์เพื่อสร้างการตกผลึกภายในเซลล์ ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ และวัสดุสิ้นเปลืองอื่นๆ ที่ใช้ควรเป็นขวดปลอดเชื้อ

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.