วิธีการผ่านเซลล์ในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์

วัฒนธรรมย่อยหมายถึงกระบวนการแบ่งวัฒนธรรมออกเป็นส่วนเล็ก ๆ เพาะเลี้ยงใหม่ลงในภาชนะเพาะเลี้ยงอื่น (ขวด) จากนั้นจึงทำการเพาะเลี้ยง ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ เป็นวัสดุสิ้นเปลืองทั่วไปเมื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ ดังนั้น วิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ในขวดโหล?

โดยทั่วไป เซลล์ในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์จะเติบโตเป็นชั้นเดียวที่หนาแน่นและโดยพื้นฐานแล้วจะอิ่มตัว เพื่อให้เซลล์สามารถสืบพันธุ์และขยายจำนวนเซลล์ต่อไปได้ จำเป็นต้องดำเนินการทางผ่าน เซลล์ที่ถูกระงับสามารถแยกออกได้โดยตรง ในขณะที่เซลล์ที่ยึดเกาะต้องถูกย่อยก่อนที่จะแยกออก โดยทั่วไป เอนไซม์โปรตีโอไลติก (เช่น ทริปซิน) ใช้เพื่อย่อยเซลล์ที่ยึดเกาะให้เป็นเซลล์เดียว นอกจากนี้ยังสามารถเพิ่มกรดเอทิลีนไดอะมีนเตตระอะซิติก (EDTA) เพื่อปรับปรุงการย่อยอาหาร สังเกตเซลล์จนเซลล์กลมและหลุดออกจากผนังขวด กระบวนการนี้มักใช้เวลา 5-15 นาที เพื่อหลีกเลี่ยงไม่ให้เซลล์จับเป็นก้อน อย่าแตะขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ในระหว่างกระบวนการย่อยเซลล์

สำหรับเซลล์ที่ย่อยยากโดยเฉพาะ คุณสามารถเพิ่มสารละลายทริปซิน EDTA ในการย่อยและวางเซลล์ที่อุณหภูมิ 37°C เพื่อ อำนวยความสะดวกในการย่อยอาหาร หลังจากที่เซลล์ถูกแยกออกจากผนังขวดแล้ว ให้เติมซีรั่มที่สมบูรณ์ทันทีเพื่อหยุดการย่อยอาหาร โปรตีนบางชนิดในซีรัมสามารถยับยั้งตับอ่อนได้ กิจกรรมของเอนไซม์ โดยทั่วไป การหมุนเหวี่ยงไม่จำเป็น ถ้าเซลล์ต้องการอาหารที่ไม่มีซีรั่มหรือซีรัมต่ำ ให้ปั่นแยกที่ 125000g เป็นเวลา 5 นาที จากนั้นทิ้งอาหารเลี้ยงเชื้อที่เลิกใช้แล้ว เติมอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ที่เหมาะสมและค่อยๆ ผสมเซลล์ก่อนการเพาะเลี้ยงย่อย

อัตราส่วนการเคลื่อนผ่านของเซลล์โดยทั่วไปคือ 1:2 -1:20 ขึ้นอยู่กับประเภทเซลล์ ในกระบวนการผ่านพ้น ทริปซินจะทำลายเยื่อหุ้มเซลล์ของบางเซลล์ คุณสามารถใช้ที่ขูดเซลล์เพื่อขูดเซลล์เบาๆ เติมสื่อในปริมาณที่เหมาะสม ปิเปตเบาๆ เพื่อผสมเซลล์ และถ่ายโอนไปยังขวดเพาะเชื้อใหม่

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.