สี่วิธีการตรวจหาการปนเปื้อนของมัยโคพลาสม่าในโรงงานเซลล์

การปนเปื้อนของมัยโคพลาสม่าเป็นปัญหาที่พบบ่อยมากเมื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ใน cell factory เซลล์ที่ปนเปื้อนมัยโคพลาสมามักจะไม่ขุ่นมัว ซึ่งแตกต่างจากการปนเปื้อนอื่นๆ ดังนั้นจึงเป็นการยากที่จะตัดสินด้วยตาเปล่า มีสี่วิธีในการพิจารณาว่าเซลล์มีการปนเปื้อนมัยโคพลาสมาหรือไม่:

1 การย้อมสี DNA fluorescence

วิธีการย้อมสี DNA fluorescence นั้นขึ้นอยู่กับหลักการที่ว่าสีย้อมเรืองแสง Hoechst33258 สามารถจับกับบริเวณที่อุดมด้วย AT base ใน DNA ของ mycoplasma จุดเรืองแสงเป็น DNA ของมัยโคพลาสมาที่อุดมไปด้วยบริเวณฐาน AT

2 เทคโนโลยี PCR

ไพรเมอร์เฉพาะได้รับการออกแบบตามลำดับการอนุรักษ์ในจีโนม Mycoplasma ขยายกรดนิวคลีอิกของตัวอย่างที่จะทดสอบ และวินิจฉัยโดยการวิเคราะห์ขนาดของผลิตภัณฑ์ที่ขยาย เทคโนโลยีการตรวจจับ PCR ใช้สำหรับการตรวจจับการปนเปื้อนของมัยโคพลาสม่า ด้วยวงจรสั้น ความไวสูง ความจำเพาะที่ดี ใช้งานง่าย และสามารถตรวจจับตัวอย่างจำนวนมากได้ในคราวเดียว

3 การทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA)

ELISA ใช้ในการตรวจหาการปนเปื้อนของมัยโคพลาสม่าด้วยความจำเพาะและความไวที่ดี และสามารถตรวจหาตัวอย่างจำนวนมากได้ในคราวเดียว มีลักษณะของการตรวจจับเชิงคุณภาพที่ง่าย รวดเร็ว และเชิงปริมาณ

4. กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน

โดยทั่วไป เซลล์ในโรงงานผลิตเซลล์จะถูกเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 48 ถึง 72 ชั่วโมง ก่อนที่เซลล์จะไหลมาบรรจบกัน เซลล์จะถูกย่อยด้วยทริปซินเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอย ตรึง ฝังตัว และหั่นเป็นชิ้นก่อนการสังเกต

วิธีการข้างต้นนี้เป็นวิธีการตรวจหาที่ใช้กันทั่วไปสี่วิธีเมื่อตรวจพบการปนเปื้อนของมัยโคพลาสม่าในโรงงานเซลล์ ปัจจุบันมีเชื้อมัยโคพลาสมามากกว่า 20 ชนิดที่ทราบกันว่าปนเปื้อนเซลล์ โดยมากกว่า 95% เป็นมัยโคพลาสมาในช่องปาก ดังนั้นผู้ปฏิบัติงานควรใส่ใจกับการดำเนินการปลอดเชื้อเมื่อเพาะเลี้ยงเซลล์

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.