การทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ของโรงงานเซลล์

ความเป็นพิษต่อเซลล์เป็นเหตุการณ์การฆ่าเซลล์อย่างหมดจดซึ่งเกิดจากเซลล์หรือสารเคมีที่ไม่อาศัยกระบวนการอะพอพโทซิสหรือเนื้อร้ายเป็นกลไกการตายของเซลล์ จากการทดสอบนี้ สามารถตัดสินได้ว่าวัตถุดิบของ cell factory มีสารที่ไม่เอื้อต่อการเจริญเติบโตของเซลล์หรือไม่

Cytotoxicity เป็นผลของสารเคมี (ยา) ต่อโครงสร้างพื้นฐานและ /หรือกระบวนการทางสรีรวิทยาของเซลล์ เช่น เยื่อหุ้มเซลล์หรือโครงสร้างโครงร่างโครงร่าง กระบวนการเมแทบอลิซึมของเซลล์ การสังเคราะห์ การเสื่อมสภาพหรือการปล่อยส่วนประกอบหรือผลิตภัณฑ์ของเซลล์ การควบคุมไอออนและการแบ่งตัวของเซลล์และกระบวนการอื่นๆ ที่นำไปสู่ความผิดปกติของการอยู่รอดของเซลล์ การเพิ่มจำนวน และ/หรือ ทำหน้าที่ทำให้เกิดอาการไม่พึงประสงค์ โดยทั่วไป การทดสอบว่าโรงงานผลิตเซลล์เป็นพิษต่อเซลล์หรือไม่สามารถทำได้โดยวิธีการต่อไปนี้:

1 วิธี MTT และ XTT: การใช้กิจกรรมของเอ็นไซม์ภายในไมโตคอนเดรีย เกลือเตตตราโซเลียมจำเพาะสามารถแปลงได้ จากนั้นจึงตรวจพบโดยเครื่องอ่านไมโครเพลท;

2 วิธี LDH: ตรวจพบความเป็นพิษต่อเซลล์โดยการตรวจจับการทำงานของเอนไซม์ของ LDH ในส่วนลอยเหนือตะกอนการเพาะเลี้ยงเซลล์;

3 วิธีการทางเอนไซม์อื่นๆ: เช่น การตรวจจับกิจกรรมของอัลคาไลน์ฟอสฟาเตสและกรดฟอสฟาเตสในสารเหนือตะกอน;

4. ชุดวิเคราะห์การเพิ่มจำนวนเซลล์: เซลล์ปกติมีเมแทบอลิซึมที่แข็งแรง และซัคซิเนต ดีไฮโดรจีเนสในไมโตคอนเดรียสามารถลดเกลือเตตตราโซเลียม (เช่น MTT, XTT, WST-1 เป็นต้น) ให้เป็นสารผลึกสีม่วง ที่สะสมอยู่รอบๆ เซลล์ จากนั้นอ่านค่า OD ค่าโดยเครื่องอ่านไมโครเพลทเพื่อตรวจจับสถานะการเพิ่มจำนวนเซลล์

5 การตรวจหาความมีชีวิตของเซลล์โดยวิธีเรืองแสงด้วยฟลูออเรสซีน: Adenylate kinase (AK) มีอยู่ในไซโตพลาสซึมของเซลล์ยูคาริโอตและโปรคาริโอตทั้งหมด และ AK สามารถกระตุ้น ADP เพื่อสร้าง ATP เมื่อเซลล์ได้รับความเสียหาย เยื่อหุ้มเซลล์จะเสียหายและ AK จะถูกปล่อยไปยังส่วนลอยเหนือตะกอนของการเพาะเลี้ยง ชุดนี้ใช้ลูซิเฟอเรสและลูซิเฟอรินในการเปล่งแสงภายใต้การกระทำของ ATP และสามารถตรวจพบในเชิงปริมาณด้วยเครื่องมือเคมีลูมิเนสเซนซ์

การทดสอบว่าโรงงานผลิตเซลล์มีความเป็นพิษต่อเซลล์หรือไม่สามารถทำได้หลายวิธี และการทดสอบนี้ยังเป็นหนึ่งใน รายการทดสอบเป็นประจำเพื่อให้มั่นใจในคุณภาพของวัสดุสิ้นเปลืองในการเพาะเลี้ยงเซลล์

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.