English
Cellpassage hänvisar till processen att dela upp kulturen i små delar, återsådd i ett annat odlingskärl och sedan odling. Cellkulturflaskor är ett vanligt förbrukningsmaterial i processen för passage, så vilka är de specifika stegen för cellpassage?
1. Ta ut cellodlingsflaskorna från inkubatorn, spraya 75 % alkohol på flaskans yta med en spritburk och överför den till det ultrarena bordet.
2. Öppna locket, aspirera försiktigt det gamla odlingsmediet, tillsätt en lämplig mängd PBS-buffert för att tvätta 1-2 gånger med en pasteurpipett och kassera PBS-bufferten.
3. Använd en pipett för att tillsätta 1-2 ml pankreatin och skaka "korset" för att få pankreatin i full kontakt med cellerna.
4. Överför cellodlingskolven med trypsin till det inverterade mikroskopstadiet och observera cellsmältningen under mikroskopet. När cellerna blir runda och faller av i stora mängder, förbered dig på att avsluta matsmältningen. Spraya flaskans yta med 75 % alkohol och överför den till Super Net Taiwan.
5. Använd en pipett (eller Pasteurpipett) för att tillsätta en lika stor mängd seruminnehållande medium för att avsluta matsmältningen. Pipettera noggrant så att cellerna faller av helt.
6. Överför den blandade vätskan i flaskan till ett centrifugrör, balansera det och centrifugera i cirka 5 minuter.
7. Efter centrifugering, spraya ytan på centrifugröret med en spritburk, överför den till det ultrarena bordet, öppna locket och häll supernatanten i avfallstanken.
8. Tillsätt en lämplig volym seruminnehållande medium och pipettera försiktigt med en pipett eller pasteurpipett för att göra en cellsuspension.
9. Dela cellsuspensionen i 2 (eller flera) rena sterila odlingskolvar, tillsätt lämplig mängd odlingsmedium och stäng locket.
10. Placera den alikvoterade odlingskolven på scenen i det inverterade mikroskopet och observera cellens tillstånd. Antalet celler bör garanteras. Ett för litet antal kommer att påverka tillväxten.
11. Markera flaskan för att ange passagetid, celltyp, operatör och annan information. Innan du lägger den i inkubatorn, spraya flaskans yta med alkohol igen, rengör operationsbordet, torka av ytan på det ultrarena bordet med 75 % alkohol och rensa upp spillvätska och sopor.
The ovan är den specifika processen att använda cellkulturflaskor för cellpassage. Observera att du bör bära sterila kläder, sterila handskar och masker under drift, och var uppmärksam på aseptiska operationer under hela processen för att undvika cellkontamination.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.