English
Subkultura se nanaša na proces delitve kulture na majhne dele, njihovo ponovno inokulacijo v drugo posodo za kulturo (steklenico) in nato gojenje. Bučke za celično kulturo so običajno uporabljeni potrošni materiali pri gojenju celic. Torej, kako subkulturirati celice v bučki?
Na splošno celice v bučkah za celično kulturo zrastejo v gosto enoslojno plast in so v bistvu nasičene. Da bi celicam omogočili, da se še naprej razmnožujejo in širijo število celic, je treba izvesti operacije prehoda. Suspendirane celice je mogoče ločiti neposredno, medtem ko je adherentne celice treba prebaviti, preden jih lahko ločimo. Na splošno se proteolitični encimi (kot je tripsin) uporabljajo za prebavo adhezivnih celic v posamezne celice. Za izboljšanje prebave lahko dodamo tudi etilendiamintetraocetno kislino (EDTA). Opazujte celice, dokler celice ne postanejo okrogle in se ločijo od stene steklenice. Ta postopek pogosto traja 5-15 minut. Da bi se izognili nastajanju celičnih grudic, med procesom prebave celic ne tapkajte po bučkah celične kulture.
Pri posebej težko prebavljivih celicah lahko dodate raztopino za prebavo tripsina EDTA in celice postavite na 37°C, da olajšati prebavo. Ko so celice ločene od stene steklenice, takoj dodajte celoten medij, ki vsebuje serum, da ustavite prebavo. Nekatere beljakovine v serumu lahko zavirajo trebušno slinavko. Encimska aktivnost. Na splošno centrifugiranje ni potrebno. Če celice potrebujejo medij brez seruma ali z nizko vsebnostjo seruma, centrifugirajte pri 125000 g 5 minut, nato zavrzite ukinjen medij, dodajte ustrezen nov medij in nežno premešajte celice pred subkulturo.
Razmerje prehoda celic je običajno 1:2 -1:20, odvisno od vrste celice. V procesu prehoda bo tripsin poškodoval celično membrano nekaterih celic. S strgalom za celice lahko nežno postrgate celice, dodate ustrezno količino medija, nežno s pipeto premešate celice in jih prenesete v novo bučko za kulturo.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.