English
Lizogene bakterije se nanašajo na bakterije, ki imajo profage integrirane v svojih kromosomih in lahko normalno rastejo in se razmnožujejo, ne da bi bile lizirane. Blagi bakteriofagi se pogosto uporabljajo na področju transdukcije, vektorjev genskega inženiringa in molekularne biologije. bučka za celično kulturo se lahko uporablja za preverjanje lizogenosti bakterij. Posebna metoda delovanja je naslednja:
1. Kultura lizogenih bakterij: Inokulirajte E. coli 225 (λ), ki se aktivira z nagibom LB, v 250 ml bučko celične kulture, ki vsebuje 20 ml raztopine kulture LB, kulturo s stresanjem pri 30 °C 16 ur, nato pa iz nje vzamete 2 ml bakterijske suspenzije in povežite z drugo. V 250-ml erlenmajerici, ki vsebuje 20 ml juhe LB, gojite s stresanjem pri 37°C 2 uri do logaritmične faze.
2. Izključi prosti fag: Če je sev, ki ga je treba testirati, Bacillus, ga lahko pripravimo v suspenzijo spor in nato 10 minut obdelamo pri 80°C, da ubijemo fag, ki se lahko adsorbira in sprosti na površini lizogenih bakterij; če sev, ki ga je treba testirati, ni Bacillus, uporabite antiserum, pripravljen s fagom ali 0,2 % raztopino natrijevega citrata, da izperete celice lizogena log faze, da odstranite površinsko adsorbiran in prosti fag. Po 10-minutnem centrifugiranju pri 4000 r/min lahko supernatantu dodamo občutljive indikatorske bakterije za določanje dvoslojne plošče, ki se uporablja za testiranje prostega faga v vzorcu in faga, ki adsorbira lizogene bakterije. Fag po centrifugiranju Celice so inducirane.
3. Indukcija lizogenih bakterij: bakterije, zbrane po centrifugiranju, dvakrat speremo s sterilno normalno fiziološko raztopino in jih pretvorimo v končno koncentracijo 1011 celic/ml z normalno fiziološko raztopino ali 100 mmol/l pufrom Tris-HCL (pH7,0). Za bakterijsko suspenzijo dodajte 5 ml bakterijske suspenzije v vsako posodo, obsevamo s 30 W UV žarnico na razdalji 30 cm 30 s, takoj dodamo 5 ml raztopine kulture LB z dvojno koncentracijo, dobro premešamo in inkubiramo v temi pri 37 °C 2 uri.
4. Pregled lizogenih sevov: Delujte po metodi dvoslojnega agarja, v zgoraj induciran lizat dodajte nekaj kapljic kloroforma in ustrezno razredčite z 10-kratno metodo redčenja. Ko izberete tri razredčitve razredčitve, vzemite 0,3 ml za vsako razredčitev. Dobro premešajte z 0,2 ml suspenzije bakterij E. coli 226, občutljive na logaritemsko fazo, nato dodajte medij polovice telesa LB, ki je bil staljen in ohlajen na 45 °C, takoj premešajte in ga nato vlijte na ploščo s trdnim medijem LB. Po strjevanju 37 Inkubirajte pri ℃ 6 ur in opazujte. Če se na kultivirani plošči pojavi veliko število plakov, to dokazuje, da je testirani sev lizogen.
Če želite preveriti, ali imajo bakterije lizogenost, sledite zgornjim korakom. Med delovanjem bodite pozorni na sterilnost postopka, da se izognete nepravilnemu delovanju, ki vpliva na rezultate testa.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.