English
Pri kultivácii rôznych buniek sú 1) Pripravte MEM médium; vysokokvalitné fetálne hovädzie sérum, 10%; dvojitá protilátka 1 %. 2) Kultivačné podmienky: plynná fáza: vzduch, 95 %; oxid uhličitý, 5 %. Teplota: 37 stupňov Celzia, vlhkosť inkubátora 70%-80%. druhom spotrebného materiálu pre bunkové kultúry, ktorý sa používa častejšie. Väčšinou sa používajú na kultiváciu adherentných buniek a špecifikácie sa pohybujú od 25 ml do 225 ml. Kultivačné médium pre bunky obličky škrečka bude používať tento spotrebný materiál a špecifické kroky jeho kultivácie sú nasledovné: Bunkové kultivačné banky 1. Prípravné práce pre bunkovú kultúru:
3) Zmrazovací roztok: 90% sérum, 10% DMSO, pripravený na použitie.
2. Spracovanie buniek:
1) Získavanie kryokonzervovaných buniek: Rýchlo pretrepte a rozmrazte kryokonzervovanú skúmavku obsahujúcu 1 ml bunkovej suspenzie vo vodnom kúpeli s teplotou 37 °C, pridajte ju do centrifugačnej skúmavky obsahujúcej 4-6 ml kompletného média a premiešajte dobre. Centrifugujte pri 1000 ot./min. počas 3-5 minút, odstráňte supernatant a resuspendujte bunky v kompletnom médiu. Bunková suspenzia sa potom pridala do banky na kultiváciu buniek obsahujúcej 6-8 ml kompletného média a kultivovala sa pri 37 °C cez noc. Bunkový rast a bunková hustota boli pozorované pod mikroskopom nasledujúci deň.
2) Bunková pasáž: Ak hustota buniek dosiahne 80%-90%, môže byť subkultivovaná.
3) Kryokonzervácia buniek: Po prijatí Pre nasledujúce experimenty sa odporúča zmraziť dávku bunkových semien v prvých 3 pasážach kultúry. Okrem toho, keď sú bunky kryokonzervované, zozbierajte natrávené bunky do centrifugačnej skúmavky podľa procesu bunkovej pasáže a pomocou hemocytometra ich spočítajte, aby ste určili hustotu kryokonzervácie buniek. Odporúčaná hustota zmrazenia všeobecných buniek je 1×106~1×107 životaschopných buniek/ml.
1) Recovery of cryopreserved cells: Quickly shake and thaw the cryopreserved tube containing 1 mL of cell suspension in a 37°C water bath, add it to a centrifuge tube containing 4-6 mL of complete medium and mix well. Centrifuge at 1000RPM for 3-5min, discard the supernatant, and resuspend the cells in complete medium. The cell suspension was then added to a cell culture flask containing 6-8 ml of complete medium and cultured at 37°C overnight. Cell growth and cell density were observed under a microscope the next day.
2) Cell passage: If the cell density reaches 80%-90%, it can be subcultured.
3) Cryopreservation of cells: After receiving the cells, it is recommended to freeze a batch of cell seeds in the first 3 passages of culture for subsequent experiments.
The above are the specific steps for culturing hamster kidney cells in cell culture flasks. In addition, when cells are cryopreserved, collect the digested cells into a centrifuge tube according to the process of cell passage, and use a hemocytometer to count them to determine the cryopreservation density of cells. The recommended freezing density of general cells is 1×106~1×107 viable cells/ml.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.