English
Koliformné baktérie označujú skupinu gramnegatívnych nebacilových baktérií, ktoré môžu fermentovať laktózu, produkovať kyselinu a plyn, aeróbne a fakultatívne anaeróbne. V praktických aplikáciách sa často používa ako indikátor toho, či sú potraviny kontaminované výkalmi. Spomedzi všetkých metód detekcie je najčastejšie používaná metóda banky na kultiváciu buniek na detekciu. Operačné kroky sú nasledovné:
1. Odber vzoriek a riedenie
(1) Podľa aseptickej metódy vložte 25 g (alebo 25 ml) testovanej vzorky do banky na kultiváciu buniek obsahujúcej 225 ml sterilnej vody (vopred nastavte vhodný počet sklenených guľôčok v banke) alebo do sterilizovanej misky, a dôkladne ho pretrepte. Alebo rozdrvte na rovnomerné zriedenie 1:10. Najlepšie je použiť sterilný homogenizátor pre tuhé vzorky a odstreďovať pri rýchlosti 8000～10000 otáčok/min počas 1 minúty, aby sa vytvorilo riedenie 1:10.
(2) Použite 1ml sterilnú slamku odsajte 1 ml riedenia 1:10, nalejte do skúmavky obsahujúcej 9 ml sterilnej vody, pretrepte a premiešajte, aby ste dosiahli riedenie 1:100, nahraďte 1 ml sterilnej slamky, stlačte Vyššie uvedené operácie sa postupne robia 10-krát sériové riedenia .
(3) Podľa požiadaviek na hygienu potravín alebo podľa odhadu kontaminácie testovaných vzoriek vyberte tri riedenia a naočkujte 3 skúmavky pre každé riedenie. Môže sa tiež naočkovať priamo vzorkou.
2. Počiatočný fermentačný test laktózy Tento test sa bežne označuje ako hypotetický test. Jeho účelom je skontrolovať vzorku na baktérie, ktoré fermentujú laktózu za vzniku plynu. Vzorka, ktorá sa má testovať, sa naočkuje do skúmavky na fermentáciu laktózovej žlčovej soli, dvojitá fermentačná skúmavka laktózovej žlčovej soli sa použije na inokulum nad 1 ml; jediná skúmavka na fermentáciu laktózovej žlčovej soli sa používa na 1 ml a menej ako 1 ml. Naočkujte 3 skúmavky pre každé riedenie a umiestnite ich do inkubátora s teplotou 36 ± 1 °C na 24 ± 2 hodín. Ak všetky skúmavky na fermentáciu laktózovej žlčovej soli neprodukujú plyn, môže to byť hlásené ako negatívne na koliformné baktérie. Ak dochádza k tvorbe plynu, postupujte podľa nižšie uvedeného postupu.
3. Separačná kultúra Fermentačné skúmavky produkujúce plyn sa naočkovali a naočkovali na agarové platne s eozín-metylénovou modrou a kultivovali sa v inkubátore pri 36 ± 1 °C počas 18-24 hodín. Potom sa pozorovala morfológia kolónií a uskutočnilo sa Gramovo farbenie, mikroskopické vyšetrenie a refermentačný test. Test dvojitej fermentácie laktózy
Takzvaný potvrdzovací test, ktorého účelom je dokázať, že gramnegatívne nebacilové baktérie izolované zo skúmavky, ktoré boli pozitívne v počiatočnom teste fermentácie laktózy, môžu skutočne fermentovať laktózu za vzniku plynu. Na vyššie uvedenom selektívnom médiu EMB vyberte 1 až 2 podozrivé koliformné kolónie na farbenie podľa Grama a súčasne naočkujte skúmavky na fermentáciu laktózy a umiestnite ich do inkubátora s teplotou 36 ± 1 ° C na 24 ± 2 hodín, aby ste mohli pozorovať plyn výroby. . V prípade, že skúmavka na fermentáciu laktózy produkuje plyn a gramové farbivo je negatívne, baktérie bez Bacillus sú hlásené ako pozitívne na koliformné baktérie; ak skúmavka na fermentáciu laktózy neprodukuje plyn alebo je gramové škvrna pozitívna, je hlásená ako negatívna na koliformné baktérie. Escherichia coli je dôležitým ukazovateľom, ktorý odráža, či je jedlo kontaminované. Ovládanie metódy detekcie je základná zručnosť, ktorú by mal mať každý potravinový inšpektor.
banky na kultiváciu buniek
4. Lactose double fermentation test
The so-called confirmation test, whose purpose is to prove that the gram-negative non-bacillus bacteria isolated from the test tube that was positive in the initial lactose fermentation test can indeed ferment lactose to produce gas. On the above-mentioned selective EMB medium, pick 1 to 2 suspicious coliform colonies for Gram staining, and inoculate lactose fermentation tubes at the same time, and place them in a 36±l°C incubator for 24±2 hours to observe the gas production. . Where the lactose fermentation tube produces gas and the gram stain is negative, Bacillus-free bacteria are reported as positive for coliforms; where the lactose fermentation tube does not produce gas or the gram stain is positive, it is reported as negative for coliforms.
The above is the operation method of using cell culture flasks to detect E. coli group indicators. Escherichia coli is an important indicator that reflects whether food is contaminated. Mastering the detection method is a basic skill that every food inspector should possess.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.