English
Bunková pasáž sa týka procesu rozdelenia kultúry na malé časti, opätovného naočkovania do inej kultivačnej nádoby a potom kultivácie. Banky na bunkové kultúry sú bežným spotrebným materiálom v procese pasážovania, takže aké sú špecifické kroky pasážovania buniek?
1. Vyberte banky s bunkovou kultúrou z inkubátora, nastriekajte 75% alkohol na povrch fľaše pomocou spreja na alkohol a preneste ho na ultračistý stôl.
2. Otvorte veko, jemne odsajte staré kultivačné médium, pridajte primerané množstvo pufra PBS, aby ste ho premyli 1-2 krát pomocou Pasteurovej pipety, a zlikvidujte pufor PBS.
3. Pomocou pipety pridajte 1-2 ml pankreatínu a pretrepte „kríž“, aby sa pankreatín úplne dostal do kontaktu s bunkami.
4. Preneste banku s bunkovou kultúrou s trypsínom do inverzného mikroskopu a pozorujte štiepenie buniek pod mikroskopom. Keď sa bunky zaguľatia a odpadnú vo veľkom množstve, pripravte sa na ukončenie trávenia. Postriekajte povrch fľaše 75% alkoholom a preneste ju do super Net Taiwan.
5. Použite pipetu (alebo Pasteurovu pipetu) na pridanie rovnakého množstva média obsahujúceho sérum na ukončenie trávenia. Dôkladne napipetujte, aby bunky úplne odpadli.
6. Preneste zmiešanú kvapalinu vo fľaši do centrifugačnej skúmavky, vyvážte ju a odstreďujte približne 5 minút.
7. Po odstredení postriekajte povrch centrifugačnej skúmavky sprejom na alkohol, preneste ju na ultračistý stôl, otvorte veko a nalejte supernatant do odpadovej nádrže.
8. Pridajte vhodný objem média obsahujúceho sérum a jemne prepipetujte pipetou alebo Pasteurovou pipetou, aby ste vytvorili bunkovú suspenziu.
9. Rozdeľte bunkovú suspenziu do 2 (alebo viacerých) čistých sterilných kultivačných baniek, pridajte vhodné množstvo kultivačného média a zatvorte veko.
10. Položte alikvotnú kultivovaciu banku na stolík inverzného mikroskopu a sledujte stav buniek. Počet buniek by mal byť zaručený. Príliš malý počet ovplyvní rast.
11. Označením fľaše uveďte čas pasáže, typ bunky, operátora a ďalšie informácie. Pred vložením do inkubátora znovu postriekajte povrch tela fľaše alkoholom, vyčistite operačný stôl, utrite povrch ultračistého stola 75% alkoholom a vyčistite odpadovú kvapalinu a odpadky.
The vyššie je špecifický proces použitia bunkové kultivačné banky na pasážovanie buniek. Upozorňujeme, že počas prevádzky by ste mali nosiť sterilné oblečenie, sterilné rukavice a masky a počas celého procesu dbať na aseptické operácie, aby ste predišli kontaminácii buniek.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.