Ako preniesť kryokonzervované bunky do kultivačných baniek

Wed May 18 13:05:19 CST 2022

Kryokonzervácia buniek je technika, ktorá umiestňuje bunky do prostredia s nízkou teplotou, aby sa znížil metabolizmus buniek na dlhodobé skladovanie. Okrem ochrany buniek sa táto technológia často používa na nákup, darovanie, výmenu a prepravu určitých buniek. Ako teda prenesieme kryokonzervované bunky do baniek na kultiváciu buniek?

Zmrazené bunky je potrebné resuscitovať pred vykonaním ďalšej operácie. Resuscitácia buniek by mala byť rýchla, aby mohla byť dobre zachovaná životaschopnosť buniek. Operáciu je možné vykonať nasledovne:

1. Po prijatí buniek skontrolujte, či je vonkajší obal kompletný; otvorte vonkajší obal a vyberte bunky uložené v suchom ľade;

2. Skontrolujte, či kryokonzervačná skúmavka nie je poškodená, či nie je obsah roztavený, a rýchlo vložte odstránenú kryokonzervačnú skúmavku do vodného kúpeľa s teplotou 37 °C, aby sa roztopila;

3. Kryokonzervačná skúmavka sa dezinfikuje 75% alkoholom a umiestni sa do biologickej bezpečnostnej skrinky;

4. Pridajte 5 ml kompletného média do 15 ml centrifugačnej skúmavky na použitie;

5 Pridajte bunkovú suspenziu v skúmavke na kryokonzerváciu do pripraveného média a jemne premiešajte;

How to transfer cryopreserved cells to cell culture flasks

6. Vložte 15 ml centrifúgovú skúmavku do centrifúgy a centrifugujte pri 1000 ot./min (približne 200 g) počas 3-5 minút;

7. Pridajte 5 ml kompletného média do 25 ml banky na kultiváciu buniek na použitie;

8. Vyberte odstredené bunky, sterilizujte ich alkoholom a vložte ich do bezpečnej skrinky;

9. Jemne odsajte odstredený bunkový supernatant, pridajte 1 ml kompletného média, aby sa bunky resuspendovali;

10. Pridajte resuspendované bunky do pripravenej banky na kultiváciu buniek a jemne premiešajte;

11. Pozorujte stav a hustotu naočkovaných buniek pod mikroskopom a kultivovaciu fľašu umiestnite do inkubátora s teplotou 37 °C na kultiváciu.

V procese obnovy buniek môže rýchla fúzia zabezpečiť, aby sa extracelulárne kryštály roztopili v krátkom čase a zabrániť poškodeniu buniek v dôsledku pomalého topenia, ktoré spôsobuje prenikanie vody do buniek za vzniku intracelulárnej rekryštalizácie. banky na kultiváciu buniek a iný spotrebný materiál by mal byť aseptický.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.