Ako pasážovať bunky vo fľašiach na kultiváciu buniek

Wed May 18 13:05:13 CST 2022

Subkultúra označuje proces rozdelenia kultúry na malé časti, ich opätovné naočkovanie do inej kultivačnej nádoby (fľaše) a následnú kultiváciu. Pre obzvlášť ťažko stráviteľné bunky môžete pridať roztok na štiepenie trypsínom EDTA a umiestniť bunky pri teplote 37 °C, aby uľahčiť trávenie. Po oddelení buniek od steny fľaše ihneď pridajte kompletné médium obsahujúce sérum, aby ste zastavili trávenie. Niektoré proteíny v sére môžu inhibovať pankreas. Enzýmová aktivita. Vo všeobecnosti nie je potrebné odstreďovanie. Ak bunky vyžadujú médium bez séra alebo s nízkym obsahom séra, centrifugujte pri 125 000 g počas 5 minút, potom zlikvidujte prerušené médium, pridajte vhodné nové médium a jemne premiešajte bunky pred subkultiváciou. sú bežne používané spotrebné materiály pri kultivácii buniek. Ako teda subkultivovať bunky vo fľašiach? Bunkové kultivačné banky Všeobecne platí, že bunky vo fľašiach pre bunkové kultúry rastú do hustej monovrstvy a sú v podstate nasýtené. Aby sa bunkám umožnilo pokračovať v reprodukcii a rozširovaní počtu buniek, je potrebné vykonať pasáže. Suspendované bunky môžu byť oddelené priamo, zatiaľ čo adherentné bunky musia byť pred oddelením štiepené. Vo všeobecnosti sa na štiepenie adherentných buniek na jednotlivé bunky používajú proteolytické enzýmy (ako je trypsín). Na zlepšenie trávenia možno pridať aj kyselinu etyléndiamíntetraoctovú (EDTA). Pozorujte bunky, kým sa nezaokrúhlia a neoddelia sa od steny fľaše. Tento proces často trvá 5-15 minút. Aby ste predišli zhlukovaniu buniek, počas procesu trávenia buniek nenaklepávajte banky na kultiváciu buniek.

Pomer pasážovania buniek je vo všeobecnosti 1:2 -1:20, v závislosti od typu bunky. V procese pasážovania trypsín poškodí bunkovú membránu niektorých buniek. Na jemné zoškrabanie buniek môžete použiť škrabku na bunky, pridať primerané množstvo média, jemne premiešať bunky pipetou a preniesť ich do novej kultivačnej banky.

How to passage the cells in the cell culture flasks

For particularly difficult-to-digest cells, you can add trypsin EDTA digestion solution and place the cells at 37°C to facilitate digestion. After the cells are separated from the bottle wall, immediately add a complete medium containing serum to stop the digestion. Certain proteins in the serum can inhibit the pancreas. Enzyme activity. In general, centrifugation is not necessary. If the cells require serum-free or low-serum medium, centrifuge at 125000g for 5 minutes, then discard the discontinued medium, add appropriate new medium and gently mix the cells before subculture.

The cell passaging ratio is generally 1:2-1:20, depending on the cell type. In the process of passaging, trypsin will damage the cell membrane of some cells. You can use a cell scraper to gently scrape the cells, add an appropriate amount of medium, gently pipette to mix the cells, and transfer them to a new culture flask.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.