English
je jednovrstvová alebo viacvrstvová štruktúra spotrebného materiálu pre bunkové kultúry. Počas procesu kultivácie buniek musíme včas pochopiť stav rastu buniek predtým, ako pristúpime k ďalšiemu kroku. Počet životaschopných buniek môže byť detekovaný farbením trypánovou modrou. Špecifická prevádzková metóda je nasledovná:1. V prípade adherentných buniek odsajte médium, pridajte digesčný roztok a trávte v inkubátore primeraný čas. Potom, čo sa bunky zaguľatili, bolo štiepenie ukončené pridaním rovnakého alebo väčšieho objemu média, ako je objem digestátu. Po odstredení sa bunková suspenzia pripraví s kultivačným médiom; 2. Vezmite 0,5 ml roztoku trypánovej modrej, 0,3 ml PBS a 0,2 ml bunkovej suspenzie a dobre premiešajte. Potom sa zmes nechá 1-2 minúty. Pomocou kapilárnej pipety alebo 10ul malej špičky pipety natiahnite malé množstvo zmesi a vstreknite ju do hemocytometra;cell factory
3. Spočítajte aspoň 1000 buniek a spočítajte počet zafarbených buniek;
4. Umyte počítaciu doštičku a krycie sklíčko ultračistou vodou a 75 % etanolom;
5. Normálne bunky sa nezafarbia, až keď bunky odumrú, priepustnosť bunkovej membrány sa zväčší, trypánová modrá vstupuje do buniek a bunky sa javia ako modré. Zmes by sa nemala dávať príliš dlho, inak normálne živé bunky tiež absorbujú farbivo, čo ovplyvní presnosť počítania;
6. Životaschopnosť buniek (%) = (celkový počet buniek - počet zafarbených buniek)/celkový počet buniek*100;
7. Podobne ako metóda počítania buniek, aj farbenie trypánovou modrou má veľkú chybu. Môže detekovať iba skorú úroveň apoptózy a nemôže ukázať rozdiel medzi kontrolnou skupinou a experimentálnou skupinou.
V procese kultivácie buniek v bunkovej továrni vždy existujú nejaké bunky, ktoré z rôznych dôvodov odumierajú. Zvládnutie počtu živých buniek a bunkovej životaschopnosti je kľúčovou operáciou v experimentoch s bunkovými kultúrami a efektívnym spôsobom, ako zabezpečiť priebeh experimentu.
7. Like the cell counting method, trypan blue staining has a large error. It can only detect the early apoptosis level, and cannot show the difference between the control group and the experimental group.
In the process of culturing cells in a cell factory, there are always some cells that die due to various reasons. Mastering the number of living cells and cell viability is a key operation in cell culture experiments and an effective way to ensure the progress of the experiment.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.