English
Doska na kultiváciu buniekje akýmsi biologickým nástrojom. Podľa tvaru sa delí na ploché dno a okrúhle dno. Počet jamiek zahŕňa 6 jamiek, 12 jamiek, 24 jamiek, 48 jamiek, 96 jamiek, 384 jamiek atď. Používa sa hlavne na kultiváciu buniek a možno ju použiť aj na meranie koncentrácii proteínu sa na detekciu MTT bežne používajú 96-jamkové platne. Metóda MTT, tiež známa ako MTT kolorimetrická metóda
, je metóda na detekciu prežitia a rastu buniek. Princíp detekcie spočíva v tom, že sukcinátdehydrogenáza v mitochondriách živých buniek môže redukovať exogénny MTT na vo vode nerozpustný modrofialový kryštálový formazan (Formazan) a ukladať ho v bunkách, zatiaľ čo mŕtve bunky takúto funkciu nemajú. Dimetylsulfoxid (DMSO) môže rozpúšťať formazan v bunkách a jeho hodnota absorpcie svetla sa meria pri 570 nm pomocou enzýmového imunotestu, ktorý môže nepriamo odrážať počet živých buniek. V určitom rozsahu počtu buniek je množstvo tvorby kryštálov MTT úmerné počtu buniek. Kroky detekcie sú nasledovné:1.
Kultivujte bunky v
. Keď je hustota buniek primeraná, pridajte 50 ul MTT do každej jamky a pokračujte v kultivácii počas 4 hodín; 96-jamková platňa na kultiváciu buniek2. 3. Zmerajte absorbanciu pri 550 nm na enzymatickom imunotestovacom prístroji (nastavte primeranú kontrolnú skupinu a prázdnu skupinu); 4. Miera prežitia buniek = hodnota absorbancie experimentálnej skupiny/hodnota absorbancie kontrolnej skupiny * 100 %. Počas operácie je potrebné poznamenať, že MTT je karcinogénny. Ak je to možné, pokúste sa nosiť rukavice z priehľadnej fólie. Pripravený MTT musí byť sterilný. MTT je veľmi citlivý na baktérie. Nezáleží na tom, či pridáte do 96-jamkovej platničky na kultiváciu buniek bez toho, aby ste ju chránili pred svetlom. , Koniec koncov, čas je krátky, alebo môžete vypnúť osvetlenie na konzole. Odsajte kultivačné médium obsahujúce MTT a pridajte 150 ul DMSO. Vibrujte vodorovne 10 minút, aby sa kryštály úplne rozpustili. V prípade suspendovaných buniek po centrifugácii odsajte médium a potom pridajte DMSO, aby sa rozpustil;
2.
Suck away the culture medium containing MTT and add 150ul of DMSO. Vibrate horizontally for 10 minutes to fully dissolve the crystals. For suspended cells, after centrifugation, suck away the medium, and then add DMSO to dissolve;
3. Measure the absorbance at 550nm on the enzyme-linked immunoassay instrument (set a reasonable control group and blank group);
4. Cell survival rate=absorbance value of experimental group/absorbance value of control group*100%.
It should be noted during the operation that MTT is carcinogenic. If possible, try to wear the kind of transparent film gloves. The prepared MTT needs to be sterile. MTT is very sensitive to bacteria. It does not matter if you add to the 96-well cell culture plate without protecting it from light. , After all, the time is short, or you can turn off the lighting on the console.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.