1. Zlikvidujte pôvodné kultivačné médium do nádoby na kultiváciu buniek plnej buniek.majú rovný krk, torticollis, uhlový krk, trojuholník, obdĺžnik atď. podľa rôznych tvarov. Špecifikácie zahŕňajú 25 ml, 75 ml, 175 ml a 250 ml. Menšie veľkosti sa väčšinou používajú na pasážovanie buniek, konzerváciu buniek a poskytovanie buniek na experimenty atď. použitie. nasýtený. Aby bunky mohli pokračovať v raste a zvýšiť počet buniek, musia byť subkultivované (rekultivované). Subkultúra je tiež spôsob, ako zachovať druhy buniek. Zároveň je to nevyhnutný proces pre rôzne experimenty s použitím kultivovaných buniek. Suspendované bunky môžu byť oddelené priamo, zatiaľ čo adherentné bunky musia byť pred oddelením štiepené. Konkrétne kroky sú nasledovné:
2. Pridajte 0,5-1 ml 0,25% roztoku pankreatínu tak, aby bunky na dne fľaštičky boli ponorené do roztoku.
3. Nasaďte gumenú zátku na fľašu a umiestnite ju pod obrátený mikroskop, aby ste pozorovali bunky. Postupom času mali pôvodné adherentné bunky postupne tendenciu byť okrúhle a pankreatín bol odstránený, keď bunky ešte neplávali, a na ukončenie štiepenia bolo pridaných 10 ml kultivačného média. Pozorovanie trávenia sa dá robiť aj voľným okom. Keď je dno fľaše biele a objavia sa jemné dierky, trávenie môže byť ukončené. Vo všeobecnosti je čas trávenia pri teplote miestnosti asi 1 až 3 minúty. Pomocou pipety vyfúknite adherentné bunky do suspenzie, rozdeľte ich do dvoch až troch fliaš, kultivačný roztok uzavrite gumovou zátkou a umiestnite ho do 37 °C, aby ste mohli pokračovať v kultivácii. Nasledujúci deň pozorujte priľnutý rast.
Vyššie uvedené je aplikácia
pri pasážovaní buniek. Spôsob prípravy digesčného roztoku je nasledovný: Odvážte 0,25 g trypsínu (aktivita 1:250), pridajte 100 ml Ca2+, Hankovho roztoku bez Mg2+ na rozpustenie, prefiltrujte Sterilizujte filtráciou, skladujte pri 4 °C a vráťte na teplotu 37 °C. °C pred použitím. EDTA sa môže tiež pridať do roztoku pankreatínu, aby konečná koncentrácia dosiahla 0,02 %.
banky na kultiváciu buniek
The above is the application of cell culture flasks in cell passaging. The preparation method of digestion solution is as follows: Weigh 0.25g trypsin (activity 1:250), add 100ml Ca2+, Mg2+-free Hank’s solution to dissolve, filter Sterilize by filtration, store at 4°C, and return to temperature at 37°C before use. EDTA can also be added to the pancreatin solution to make the final concentration reach 0.02%.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.