English
Bunková lýza je dôležitá experimentálna metóda na zmenu bunkovej permeability a aktivity. Znamená to, že potom, čo je bunka infikovaná vírusom, vírus využíva živiny v hostiteľskej bunke na syntézu vlastného potomstva a potomok vírusu zničí hostiteľskú bunku a uvoľní sa z buniek. V experimentoch s lýzou buniek sú 2. Pridajte 3 ml 4 °C vopred vychladeného PBS (0,01 M pH 7,2 bežným spotrebným materiálom. Kroky lýzy buniek sú nasledujúce: Fľaše na kultiváciu buniek. Vylejte kultivačné médium a otočte fľašu s bunkovou kultúrou hore dnom na savý papier tak, aby absorbčný papier absorboval kultivačné médium (alebo postavte fľašu na chvíľu do zvislej polohy, aby zvyškové kultivačné médium pretieklo na dno fľaše a potom ho pomocou pipety odsajte).
～
7,3) do každej fľaše s bunkami. Položte bunky naplocho a jemne pretrepávajte 1 minútu, aby sa bunky premyli, a potom zlikvidujte premývací roztok. Opakujte vyššie uvedenú operáciu dvakrát, pričom bunky trikrát premyte, aby sa vymyla kultivačná tekutina. Zlikvidujte PBS a položte kultivačnú banku na ľad.3. Pridajte 10 ul PMSF (100 mM) do 1 ml lyzačného pufra, dobre pretrepte a umiestnite na ľad. (PMSF sa musí pred zmiešaním s lyzačným roztokom pretrepávať, kým nezostanú žiadne kryštály.) 4. Pridajte 400 ul lyzačného pufra obsahujúceho PMSF do každej banky s bunkami a lyzujte na ľade počas 30 minút. Na úplnú lýzu buniek je potrebné banku často pretrepávať.5. Po lýze použite čistú škrabku na zoškrabanie buniek na jednej strane kultivačnej banky (účinok by mal byť rýchly) a potom pomocou pištole premiestnite zvyšky buniek a lyzát do 1,5 ml centrifugačnej skúmavky. (Celá operácia by sa mala vykonávať čo najviac na ľade.)
6. Centrifugujte pri 12 000 ot./min. pri 4 °C počas 5 minút. (Vopred zapnite odstredivku, aby sa predchladila)
7. Preneste odstredený supernatant do centrifugačnej skúmavky na 0,5 minúty a skladujte ho pri -20 °C.
sa nepoužívajú len na experimenty s lýzou buniek, ale aj na bunkové a tkanivové kultúry v strednom meradle v laboratóriu, ako sú bunky Vero bunky HEK 293, bunky CAR-T, bunky CHO, bunky hmyzu atď.
6. Centrifuge at 12000 rpm at 4°C for 5 min. (Turn on the centrifuge in advance to pre-cool)
7. Transfer the centrifuged supernatant into a centrifuge tube for 0.5 min and store it at -20°C.
Cell culture flasks are not only used for cell lysis experiments, but also for medium-scale cell and tissue culture in the laboratory, such as Vero cells, HEK 293 cells, CAR-T cells, CHO cells, insect cells, etc.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.