Криоконсервация клеток — это метод, при котором клетки помещаются в среду с низкой температурой для снижения клеточного метаболизма для длительного хранения. Помимо защиты клеток, эта технология часто используется для покупки, дарения, обмена и транспортировки определенных клеток. Итак, как мы переносим криоконсервированные клетки в колбы для клеточных культур?
Замороженные клетки необходимо реанимировать, прежде чем можно будет провести следующую операцию. Реанимация клеток должна быть быстрой, чтобы можно было хорошо сохранить жизнеспособность клеток. Операцию можно провести следующим образом:
1. После получения ячеек проверьте комплектность внешней упаковки; открыть внешнюю упаковку и вынуть клетки, хранящиеся в сухом льду;
2. Проверьте, не повреждена ли пробирка для криоконсервации, не расплавилось ли ее содержимое, и быстро поместите извлеченную пробирку для криоконсервации в водяную баню с температурой 37℃, чтобы она расплавилась;
3. Пробирку для криоконсервации дезинфицируют 75% спиртом и помещают в бокс биологической безопасности;
4. Добавьте 5 мл полной среды в центрифужную пробирку на 15 мл для использования;
5 Добавьте клеточную суспензию из пробирки для криоконсервации в подготовленную среду и осторожно перемешайте;
6. Поместите центрифужную пробирку объемом 15 мл в центрифугу и центрифугируйте при 1000 об/мин (около 200 г) в течение 3–5 мин;
7. Добавьте 5 мл полной среды в колбу для культивирования клеток на 25 мл для использования;
8. Достаньте отцентрифугированные клетки, простерилизуйте их спиртом и поместите в безопасный шкаф;
9. Аккуратно аспирируйте отцентрифугированный клеточный супернатант, добавьте 1 мл полной среды для ресуспендирования клеток;
10. Добавьте ресуспендированные клетки в подготовленную колбу для культивирования клеток и осторожно перемешайте;
11. Наблюдайте за состоянием и плотностью инокулированных клеток под микроскопом и поместите культуральную колбу в инкубатор при 37 ° C для культивирования.
В процессе восстановления клеток быстрое слияние может гарантировать, что внеклеточные кристаллы расплавятся за короткий период времени. времени и избежать повреждения клеток из-за медленного плавления, которое заставляет воду проникать в клетки, образуя внутриклеточную рекристаллизацию. колбы для клеточных культур и другие используемые расходные материалы должны быть асептическими.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.