Под субкультивированием понимается процесс деления культуры на мелкие части, пересева их в другой культуральный сосуд (бутылку) и последующего культивирования. Флаконы для культивирования клеток обычно используются при культивировании клеток. Итак, как пересевать клетки в колбах?
Как правило, клетки в колбах для культивирования клеток вырастают в плотный монослой и в основном насыщаются. Для того, чтобы клетки могли продолжать размножаться и увеличивать количество клеток, необходимо проводить операции пассажа. Подвешенные клетки можно отделить напрямую, в то время как прикрепленные клетки необходимо переварить, прежде чем их можно будет отделить. Как правило, протеолитические ферменты (такие как трипсин) используются для расщепления прикрепленных клеток до отдельных клеток. Этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА) также может быть добавлена для улучшения пищеварения. Наблюдайте за клетками, пока они не станут круглыми и не оторвутся от стенки бутылки. Этот процесс часто занимает 5-15 минут. Во избежание образования скоплений клеток не стучите по колбам с клеточными культурами в процессе переваривания клеток.
Для особо трудно перевариваемых клеток можно добавить раствор трипсина и ЭДТА для расщепления и поместить клетки при температуре 37°C для облегчить пищеварение. После отделения клеток от стенки бутылки немедленно добавьте полную среду, содержащую сыворотку, чтобы остановить пищеварение. Определенные белки в сыворотке могут подавлять работу поджелудочной железы. Ферментативная активность. Как правило, центрифугирование не требуется. Если для клеток требуется среда без сыворотки или среда с низким содержанием сыворотки, центрифугируйте при 125000g в течение 5 минут, затем выбросьте прекращенную среду, добавьте подходящую новую среду и осторожно перемешайте клетки перед пересевом.
Коэффициент пассирования клеток обычно составляет 1:2. -1:20, в зависимости от типа ячейки. В процессе пассирования трипсин повреждает клеточную мембрану некоторых клеток. Вы можете использовать скребок для клеток, чтобы осторожно соскоблить клетки, добавить соответствующее количество среды, осторожно перемешать клетки пипеткой и перенести их в новую культуральную колбу.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.