Как измерить количество живых клеток на клеточной фабрике

Wed May 18 17:32:21 CST 2022

представляет собой однослойную или многослойную структуру расходных материалов для клеточных культур. В процессе культивирования клеток нам необходимо вовремя понять состояние роста клеток, прежде чем переходить к следующему шагу. Количество жизнеспособных клеток можно определить с помощью окрашивания трипановым синим. Конкретный метод работы выглядит следующим образом: 1. Для прилипших клеток аспирируйте среду, добавьте раствор для переваривания и переварите в инкубаторе в течение соответствующего времени. После того как клетки стали круглыми, пищеварение останавливали добавлением равного или большего объема среды, чем объем дигестата. После центрифугирования готовят клеточную суспензию с культуральной средой;cell factory

2. Возьмите 0,5 мл раствора трипанового синего, 0,3 мл PBS и 0,2 мл клеточной суспензии и хорошо перемешайте. Затем смесь оставляли на 1-2 мин. Используйте капиллярную пипетку или небольшой наконечник пипетки на 10 мкл, чтобы набрать небольшое количество смеси и ввести ее в гемоцитометр;

3. Подсчитайте не менее 1000 клеток и подсчитайте количество окрашенных клеток;

4. Промойте счетную пластину и покровное стекло ультрачистой водой и 75% этанолом;

5. Нормальные клетки не будут окрашиваться, только после гибели клеток проницаемость клеточной мембраны становится больше, в клетки проникает трипановый синий, и клетки кажутся синими. Смесь не следует размещать слишком долго, иначе нормальные живые клетки также впитают краситель, что повлияет на точность подсчета;

6. Жизнеспособность клеток (%) = (общее количество клеток - количество окрашенных клеток)/общее количество клеток*100;

7. Как и метод подсчета клеток, окрашивание трипановым синим имеет большую погрешность. Он может определить только уровень раннего апоптоза и не может показать разницу между контрольной группой и экспериментальной группой.

В процессе культивирования клеток на клеточной фабрике всегда есть клетки, которые погибают по разным причинам. Освоение числа живых клеток и жизнеспособности клеток является ключевой операцией в экспериментах с клеточными культурами и эффективным способом обеспечения прогресса эксперимента.

In the process of culturing cells in a cell factory, there are always some cells that die due to various reasons. Mastering the number of living cells and cell viability is a key operation in cell culture experiments and an effective way to ensure the progress of the experiment.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.