Применение планшета для клеточных культур при обнаружении МТТ

Wed May 18 17:29:25 CST 2022

планшета для культивирования клетокявляется своего рода биологическим инструментом. Он делится на плоское дно и круглое дно в зависимости от формы. Количество лунок включает 6 лунок, 12 лунок, 24 лунки, 48 ​​лунки, 96 лунок, 384 лунки и т. д. Он в основном используется для клеточных культур, а также может использоваться для измерения концентрации белка, 96-луночные планшеты обычно используются для обнаружения МТТ.

Метод МТТ, также известный как колориметрический метод МТТ, представляет собой метод определения выживания и роста клеток. Принцип обнаружения заключается в том, что сукцинатдегидрогеназа в митохондриях живых клеток может восстанавливать экзогенный МТТ до нерастворимого в воде сине-фиолетового кристалла формазана (формазан) и депонировать его в клетках, в то время как мертвые клетки такой функцией не обладают. Диметилсульфоксид (ДМСО) может растворять формазан в клетках, и его показатель светопоглощения измеряется при 570 нм с помощью иммуноферментного анализа, который может косвенно отражать количество живых клеток. В пределах определенного диапазона числа клеток количество образовавшихся кристаллов МТТ пропорционально количеству клеток. Шаги обнаружения следующие:

1. Культивируйте клетки в 96-луночный планшет для культивирования клеток. После достижения подходящей плотности клеток добавьте 50 мкл МТТ в каждую лунку и продолжайте культивирование в течение 4 часов;

2. Отсосите культуральную среду, содержащую МТТ, и добавьте 150 мкл ДМСО. Вибрируйте горизонтально в течение 10 минут, чтобы полностью растворить кристаллы. Для взвешенных клеток после центрифугирования отсосите среду, а затем добавьте ДМСО для растворения;

3. Измерьте оптическую плотность при 550 нм на приборе для иммуноферментного анализа (установите разумную контрольную группу и пустую группу);

4. Коэффициент выживаемости клеток = показатель поглощения экспериментальной группы/значение поглощения контрольной группы*100%.

Во время операции следует учитывать, что МТТ является канцерогенным. Если есть возможность, попробуйте надеть прозрачные пленочные перчатки. Подготовленный МТТ должен быть стерильным. МТТ очень чувствителен к бактериям. Не имеет значения, если вы добавляете в 96-луночный планшет для культивирования клеток, не защищая его от света. , Ведь времени мало, а то можно выключить подсветку на пульте.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.