English
Колбы для культивирования клеток имеют прямую шею, кривошею, угловую шею, треугольник, прямоугольник и т. д. в зависимости от формы. Спецификации включают 25 мл, 75 мл, 175 мл и 250 мл. Меньшие размеры в основном используются для пассирования клеток, сохранения клеток и предоставления клеток для экспериментов и т. д.
После того, как клетки вырастут в плотный монослой в колбе для культивирования клеток, они в основном насыщенный. Для того чтобы клетки могли продолжать расти и увеличивать количество клеток, их необходимо пересевать (повторно культивировать). Субкультура также является способом сохранения видов клеток. В то же время это необходимый процесс для различных экспериментов с использованием культивируемых клеток. Подвешенные клетки можно отделить напрямую, в то время как прикрепленные клетки необходимо переварить, прежде чем их можно будет отделить. Конкретные шаги следующие:
1. Вылейте исходную культуральную среду в колбу для клеточных культур, полную клеток.
2. Добавить 0,5-1мл 0,25% раствора панкреатина так, чтобы клетки на дне флакона были погружены в раствор.
3. Наденьте на бутылку резиновую пробку и поместите ее под инвертированный микроскоп, чтобы наблюдать за клетками. С течением времени исходные прикрепленные клетки постепенно приобретали круглую форму, и панкреатин отбрасывали, когда клетки еще не всплыли, и добавляли 10 мл культуральной среды для прекращения расщепления. Наблюдение за пищеварением также можно проводить невооруженным глазом. Когда дно бутылки становится белым и появляются мелкие отверстия, пищеварение можно прекращать. Как правило, время переваривания при комнатной температуре составляет около 1-3 минут.
4. С помощью пипетки выдуйте прилипшие клетки в суспензию, разделите их на две-три бутылки, закройте культуральный раствор резиновой пробкой и поместите его при 37°C для продолжения культивирования. Наблюдайте за прилипшим ростом на следующий день.
Выше приведено применение колбы для клеточных культур при пассировании клеток. Метод приготовления раствора для переваривания следующий: Взвесьте 0,25 г трипсина (активность 1:250), добавьте 100 мл раствора Хенкса, не содержащего Ca2+, Mg2+, для растворения, профильтруйте. Стерилизуйте фильтрованием, храните при 4°C и доведите до температуры 37 °C перед использованием. ЭДТА также можно добавить в раствор панкреатина, чтобы конечная концентрация достигла 0,02%.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.