English
Materiale și Metode
3.1. Shake Flask Cultivations
Preculturi de celule suspensie MDCK.SUS2 au fost crescute în Celulele au fost cultivate într-un mediu definit chimic, fără proteine și fără componente animale, Smif8 (Smif8 PGD 2x, suplimentat cu 5 mM glutamina și 8 mM piruvat), dezvoltat special pentru cultivarea celulelor MDCK în suspensie [95]. (baloane Erlenmeyer din policarbonat de 125 ml, #431143, Corning®, New York City, NY, SUA) cu un volum de lucru de 50 ml (wv) , într-un incubator Multitron Pro (Infors HT, Bottmingen, Elveția) la 37 °C și 5% atmosferă CO2 cu o frecvență de agitare de 180 rpm. Celulele au fost trecute la fiecare 3-4 zile cu o densitate de însămânțare de 0,5-0,8 × 106 celule/ml. în celulele MDCK aderente (ECACC # 84121903). Virusul de semințe a avut un titru de 1,1 × 109 TCID50/mL.
Experimentele de creștere și infecție pentru validarea modelului au fost efectuate folosind baloane agitate de 500 mL (#4113-0500, Nalgene™, Thermo Scientific, Waltham, MA, SUA) cu un volum inițial de cultivare de 200 mL la 150 rpm. Au fost efectuate două culturi, una simulată de infecție (Cultivarea 1), în care celulele au crescut timp de aproximativ 200 de ore și o infecție (Cultivarea 2), în care celulele au fost infectate cu IAV la aproximativ 49 de ore după inoculare. Pentru a realiza o infecție sincronă a populației celulare, a fost utilizat un moi = 10. Datorită concentrației relativ scăzute de celule la momentul infecției (2,1 × 106 celule/mL) și a moi mare utilizată, nu a fost necesară nici înlocuirea mediului, nici adăugarea de tripsină (pentru activarea virusului). În ambele culturi, s-a adăugat apă sterilă Milli-Q înainte de prelevare pentru a compensa evaporarea apei (1–2 mL/zi), deoarece experimentul a fost efectuat într-un incubator nehidratat.
Sursa de la:
https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
Source from: https://www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.