Un cell factory este o structură cu un singur strat sau cu mai multe straturi de consumabile de cultură celulară. În timpul procesului de cultură celulară, trebuie să înțelegem starea de creștere a celulelor la timp înainte de a trece la pasul următor. Numărul de celule viabile poate fi detectat prin colorarea cu albastru tripan. Metoda de operare specifică este următoarea:
1. Pentru celulele aderente, aspirați mediul, adăugați soluția de digestie și digerați în incubator pentru un timp adecvat. După ce celulele au devenit rotunde, digestia a fost încheiată prin adăugarea unui volum egal sau mai mare de mediu decât volumul digestatului. După centrifugare, suspensia celulară se face cu mediu de cultură;
2. Luați 0,5 ml soluție de albastru tripan, 0,3 ml PBS și 0,2 ml suspensie de celule și amestecați bine. Apoi amestecul a fost lăsat timp de 1-2 minute. Utilizați o pipetă capilară sau un vârf de pipetă mic de 10 ul pentru a extrage o cantitate mică de amestec și injectați-o în hemocitometru;
3. Numărați cel puțin 1000 de celule și numărați numărul de celule colorate;
4. Spălați placa de numărare și lamela cu apă ultrapură și etanol 75%;
5. Celulele normale nu vor fi colorate, doar după ce celulele mor, permeabilitatea membranei celulare devine mai mare, albastrul tripan intră în celule, iar celulele apar albastre. Amestecul nu trebuie plasat prea mult timp, altfel celulele vii normale vor prelua și colorantul, ceea ce va afecta acuratețea numărării;
6. Viabilitatea celulară (%) = (numărul total de celule - numărul de celule colorate)/numărul total de celule*100;
7. La fel ca metoda de numărare a celulelor, colorarea cu albastru tripan are o eroare mare. Poate detecta doar nivelul de apoptoză timpurie și nu poate arăta diferența dintre grupul de control și grupul experimental.
În procesul de cultivare a celulelor într-o fabrică de celule, există întotdeauna unele celule care mor din diverse motive. Stăpânirea numărului de celule vii și a viabilității celulare este o operațiune cheie în experimentele de cultură celulară și o modalitate eficientă de a asigura progresul experimentului.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.