English
Contaminarea cu micoplasmă este o problemă foarte frecventă atunci când se cultivă celule în fabrici de celule. Spre deosebire de alte contaminări, celulele contaminate cu micoplasmă, în general, nu devin tulburi, deci este dificil de judecat cu ochiul liber. Există patru moduri de a determina dacă celulele sunt contaminate cu micoplasmă:
1. Colorarea cu fluorescență ADN
Metoda de colorare cu fluorescență ADN se bazează pe principiul că colorantul fluorescent Hoechst33258 se poate lega de regiunea bogată în bază AT din ADN-ul micoplasmei. Punctele fluorescente sunt ADN de micoplasmă bogat în regiuni de bază AT.
2. Tehnologia PCR
Primerii specifici sunt proiectați în funcție de secvențele conservate din genomul Mycoplasma, acidul nucleic al probei de testat este amplificat, iar diagnosticul se face prin analiza mărimii produsului amplificat. Tehnologia de detecție PCR este utilizată pentru detectarea contaminării cu micoplasmă, cu ciclu scurt, sensibilitate ridicată, specificitate bună, funcționare simplă și poate detecta un număr mare de probe la un moment dat.
3. Testul imunosorbent legat de enzime (ELISA)
ELISA este utilizat în detectarea contaminării cu micoplasmă, cu o bună specificitate și sensibilitate și poate finaliza detectarea unui număr mare de probe în același timp. Are caracteristicile unei detectii calitative simple, rapide si cantitative.
4. Microscopul electronic
În general, celulele din fabricile de celule sunt cultivate timp de 48 până la 72 de ore. Înainte ca celulele să fie aproape confluente, celulele sunt digerate cu tripsină pentru a face o suspensie de celule, fixate, încorporate și tăiate înainte de observare. În prezent, există peste 20 de tipuri de micoplasme cunoscute pentru contaminarea celulelor, dintre care mai mult de 95% sunt micoplasme orale, astfel încât operatorii ar trebui să acorde atenție funcționării aseptice atunci când cultivă celule.
The above are four commonly used detection methods when detecting mycoplasma contamination in cell factories. At present, there are more than 20 kinds of mycoplasma known to contaminate cells, of which more than 95% are oral mycoplasma, so operators should pay attention to aseptic operation when culturing cells.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.