1. Aruncați mediul de cultură original în balonul de cultură celulară plin cu celule.au gât drept, torticolis, gât unghiular, triunghi, dreptunghi etc. după diferite forme. Specificațiile includ 25 ml, 75 ml, 175 ml și 250 ml. Dimensiunile mai mici sunt utilizate în principal pentru trecerea celulelor, conservarea celulelor și furnizarea de celule pentru experimente, etc. Utilizare. saturate. Pentru a permite celulelor să continue să crească și să crească numărul de celule, acestea trebuie să fie subcultivate (recultivate). Subcultura este, de asemenea, o modalitate de conservare a speciilor de celule. În același timp, este un proces necesar pentru diverse experimente folosind celule de cultură. Celulele suspendate pot fi separate direct, în timp ce celulele aderente trebuie digerate înainte de a putea fi separate. Pașii specifici sunt următorii:
2. Adăugați 0,5-1ml soluție de pancreatină 0,25%, astfel încât celulele de la fundul sticlei să fie scufundate în soluție.
3. Puneți un dop de cauciuc pe flacon și puneți-l sub un microscop inversat pentru a observa celulele. Odată cu trecerea timpului, celulele aderente originale au avut treptat tendința de a fi rotunde, iar pancreatina a fost aruncată când celulele nu plutiseră încă și s-au adăugat 10 ml de mediu de cultură pentru a termina digestia. Observarea digestiei se poate face si cu ochiul liber. Când se vede fundul sticlei albe și apar găuri fine, digestia poate fi oprită. În general, timpul de digestie la temperatura camerei este de aproximativ 1-3 minute.
4. Utilizați o pipetă pentru a sufla celulele aderente într-o suspensie, împărțiți-le în două-trei sticle, introduceți soluția de cultură cu un dop de cauciuc și puneți-o la 37°C pentru a continua cultivarea. Observați creșterea aderentă a doua zi.
Cea mai sus este aplicarea
în trecerea celulelor. Metoda de preparare a soluției de digestie este următoarea: Se cântăresc 0,25 g tripsină (activitate 1:250), se adaugă 100 ml de soluție Hank fără Ca2+, Mg2+ pentru a se dizolva, se filtrează Sterilizează prin filtrare, se păstrează la 4°C și se revine la temperatura de 37°C. °C înainte de utilizare. EDTA poate fi adăugat și în soluția de pancreatină pentru a face ca concentrația finală să ajungă la 0,02%.
baloane de cultură celularăcell culture flasks in cell passaging. The preparation method of digestion solution is as follows: Weigh 0.25g trypsin (activity 1:250), add 100ml Ca2+, Mg2+-free Hank’s solution to dissolve, filter Sterilize by filtration, store at 4°C, and return to temperature at 37°C before use. EDTA can also be added to the pancreatin solution to make the final concentration reach 0.02%.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.