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As bactérias coliformes referem-se a um grupo de bactérias gram-negativas não bacilos que podem fermentar a lactose, produzir ácido e gás, aeróbicas e anaeróbicas facultativas. Em aplicações práticas, é frequentemente usado como um indicador de que os alimentos estão contaminados por fezes. Entre todos os métodos de detecção, o uso de cell culture flasks para detecção é o mais comumente usado. As etapas da operação são as seguintes:
1. Amostragem e diluição
(1) De acordo com o método asséptico, coloque 25g (ou 25mL) da amostra de teste em um frasco de cultura de células contendo 225mL de água estéril (número adequado de contas de vidro no frasco) ou um almofariz esterilizado, e agite-o bem. Ou moa para fazer uma diluição uniforme de 1:10. É melhor usar um homogeneizador estéril para amostras sólidas e centrifugar a uma velocidade de 8000～10000r/min por 1 min para fazer uma diluição de 1:10.
(2) Use um canudo estéril de 1mL sugar 1Ml da diluição 1:10, despejar em um tubo de ensaio contendo 9mL de água estéril, agitar e misturar para fazer uma diluição 1:100, substituir por um canudo estéril de 1mL, pressionar As operações acima são feitas sucessivamente 10 vezes diluições seriadas .
(3) De acordo com os requisitos de higiene alimentar ou a estimativa da contaminação das amostras de teste, selecionar três diluições e inocular 3 tubos para cada diluição. Também pode ser inoculado diretamente com a amostra.
2. Teste de fermentação inicial da lactose
Isso é comumente referido como teste hipotético. Seu objetivo é verificar a amostra em busca de bactérias que fermentam a lactose para produzir gás. A amostra a ser testada é inoculada no tubo de fermentação de sais biliares de lactose, o tubo de fermentação de sais biliares de lactose duplo é usado para o inóculo acima de 1 mL; o único tubo de fermentação de sais biliares de lactose é usado para 1 mL e menos de 1 mL. Inocule 3 tubos para cada diluição e coloque-os em uma incubadora de 36±1℃ por 24±2h. Se todos os tubos de fermentação de sais biliares de lactose não produzirem gás, pode ser relatado como negativo para bactérias coliformes. Se houver produção de gás, siga o procedimento abaixo.
3. Cultura de separação Os tubos de fermentação produtores de gás foram semeados e inoculados em placas de ágar azul de metileno eosina e cultivados em uma incubadora a 36±1°C por 18-24 horas. Em seguida, observou-se a morfologia da colônia e realizou-se a coloração de Gram, exame microscópico e teste de re-fermentação.
4. Teste de dupla fermentação da lactose
O chamado teste de confirmação, cujo objetivo é provar que as bactérias gram-negativas não bacilos isoladas do tubo de ensaio que deu positivo no teste inicial de fermentação da lactose podem de fato fermentar a lactose para produzir gás. No meio EMB seletivo mencionado acima, escolha 1 a 2 colônias de coliformes suspeitas para coloração de Gram e inocule os tubos de fermentação de lactose ao mesmo tempo e coloque-os em uma incubadora a 36±l°C por 24±2 horas para observar o gás Produção. . Onde o tubo de fermentação da lactose produz gás e a coloração de Gram é negativa, as bactérias livres de Bacillus são relatadas como positivas para coliformes; onde o tubo de fermentação da lactose não produz gás ou a coloração de Gram é positiva, é relatado como negativo para coliformes.
O acima é o método de operação de usar
para detectar indicadores do grupo E. coli. A Escherichia coli é um indicador importante que reflete se o alimento está contaminado. Dominar o método de detecção é uma habilidade básica que todo inspetor de alimentos deve possuir.cell culture flasksfrascos de cultura celular
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.