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A passagem da célula refere-se ao processo de dividir a cultura em pequenas partes, re-semeadura em outro recipiente de cultura e, em seguida, cultura. Cell culture frascos são consumíveis comuns no processo de passagem, então quais são as etapas específicas da passagem de células?
1. Retire os frascos de cultura de células da incubadora, borrife álcool 75% na superfície do frasco com um spray de álcool e transfira-o para a mesa ultralimpa.
2. Abra a tampa, aspire suavemente o meio de cultura antigo, adicione uma quantidade adequada de tampão PBS para lavar 1-2 vezes com uma pipeta Pasteur e descarte o tampão PBS.
3. Use uma pipeta para adicionar 1-2ml de pancreatina e agite a "cruz" para que a pancreatina entre em contato total com as células.
4. Transferir o frasco de cultura de células com tripsina para o estágio de microscópio invertido e observar a digestão das células sob o microscópio. Quando as células se tornam redondas e caem em grandes quantidades, prepare-se para terminar a digestão. Pulverize a superfície da garrafa com álcool 75% e transfira-a para o super Net Taiwan.
5. Use uma pipeta (ou pipeta Pasteur) para adicionar uma quantidade igual de meio contendo soro para terminar a digestão. Pipete completamente para permitir que as células caiam completamente.
6. Transfira o líquido misturado na garrafa para um tubo de centrífuga, equilibre-o e centrifugue por cerca de 5 minutos.
7. Após a centrifugação, pulverize a superfície do tubo de centrifugação com um spray de álcool, transfira-o para a mesa ultra-limpa, abra a tampa e despeje o sobrenadante no tanque de resíduos.
8. Adicione um volume adequado de meio contendo soro e pipete suavemente com uma pipeta ou pipeta Pasteur para fazer uma suspensão de células.
9. Divida a suspensão de células em 2 (ou mais) frascos de cultura estéreis limpos, adicione a quantidade apropriada de meio de cultura e feche a tampa.
10. Coloque o frasco de cultura aliquotado no palco do microscópio invertido e observe a condição das células. O número de células deve ser garantido. Número muito pequeno afetará o crescimento.
11. Marque a garrafa para indicar o tempo de passagem, tipo de célula, operador e outras informações. Antes de colocá-lo na incubadora, borrife novamente a superfície do corpo da garrafa com álcool, limpe a mesa de operação, limpe a superfície da mesa ultralimpa com álcool 75% e limpe os resíduos líquidos e lixo. acima é o processo específico de usar
para passagem de células. Observe que você deve usar roupas estéreis, luvas e máscaras estéreis durante a operação e prestar atenção às operações assépticas durante todo o processo para evitar a contaminação das células.cell culture flasksfrascos de cultura de células
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.