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A criopreservação celular é uma técnica que coloca as células em um ambiente de baixa temperatura para reduzir o metabolismo celular para armazenamento a longo prazo. Além de proteger as células, essa tecnologia é frequentemente usada para comprar, presentear, trocar e transportar certas células. Então, como transferimos células criopreservadas para frascos de cultura de células?
As células congeladas precisam ser ressuscitadas antes que a próxima operação possa ser realizada. A ressuscitação das células deve ser rápida, para que a viabilidade das células possa ser bem preservada. A operação pode ser realizada da seguinte forma:
1. Após o recebimento das células, verifique se a embalagem externa está completa; abra a embalagem externa e retire as células armazenadas em gelo seco;
2. Verifique se o tubo de criopreservação está danificado, se o conteúdo está derretido e coloque rapidamente o tubo de criopreservação removido em banho-maria a 37 ℃ para derreter;
3. O tubo de criopreservação é desinfetado com álcool 75% e colocado em cabine de segurança biológica;
4. Adicione 5ml de meio completo a um tubo de centrífuga de 15ml para uso;
5 Adicione a suspensão de células no tubo de criopreservação ao meio preparado e misture delicadamente;
6. Coloque o tubo de centrífuga de 15mL na centrífuga e centrifugue a 1000rpm/min (cerca de 200g) por 3-5min;
7. Adicione 5 ml de meio completo a 25 ml de frasco de cultura de células para uso;
8. Retire as células centrifugadas, esterilize-as com álcool e coloque-as num armário seguro;
9. Aspire suavemente o sobrenadante de células centrifugado, adicione 1 ml de meio completo para ressuspender as células;
10. Adicione as células ressuspensas ao frasco de cultura de células preparado e misture delicadamente;
11. Observe o estado e a densidade das células inoculadas ao microscópio e coloque o frasco de cultura em uma incubadora a 37°C para cultura.
No processo de recuperação de células, a fusão rápida pode garantir que os cristais extracelulares derretam em um curto período de tempo, e evitar danos às células devido à fusão lenta que faz com que a água penetre nas células para formar a recristalização intracelular. O frascos de cultura de células e outros consumíveis usados devem ser assépticos.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.