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A subcultura refere-se ao processo de dividir a cultura em pequenas partes, re-inoculando-as em outro recipiente de cultura (garrafa) e depois cultivando. Cell culture frascos são consumíveis comumente usados no cultivo de células. Então, como subcultivar as células no frasco?
Geralmente, as células nos frascos de cultura celular crescem em uma monocamada densa e são basicamente saturadas. Para permitir que as células continuem a se reproduzir e expandir o número de células, é necessário realizar operações de passagem. As células suspensas podem ser separadas diretamente, enquanto as células aderentes precisam ser digeridas antes de serem separadas. Geralmente, enzimas proteolíticas (como tripsina) são usadas para digerir células aderentes em células únicas. O ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) também pode ser adicionado para melhorar a digestão. Observe as células até que as células fiquem redondas e se soltem da parede da garrafa. Esse processo geralmente leva de 5 a 15 minutos. Para evitar aglomerados de células, não bata nos frascos de cultura de células durante o processo de digestão das células.
Para células particularmente difíceis de digerir, você pode adicionar solução de digestão de tripsina EDTA e colocar as células a 37°C para facilitar a digestão. Após a separação das células da parede do frasco, adicione imediatamente um meio completo contendo soro para interromper a digestão. Certas proteínas no soro podem inibir o pâncreas. Atividade enzimática. Em geral, a centrifugação não é necessária. Se as células precisarem de meio sem soro ou com baixo teor de soro, centrifugue a 125000g por 5 minutos, descarte o meio descontinuado, adicione novo meio apropriado e misture suavemente as células antes da subcultura.
A proporção de passagem de células é geralmente 1:2 -1:20, dependendo do tipo de célula. No processo de passagem, a tripsina danificará a membrana celular de algumas células. Você pode usar um raspador de células para raspar suavemente as células, adicionar uma quantidade apropriada de meio, pipetar suavemente para misturar as células e transferi-las para um novo frasco de cultura.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.