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A cultura de células envolve a inoculação de células, cultivo, colheita e outros processos. As células no frascos de cultura celular cresceram até certo ponto e as células precisam ser colhidas. Neste momento, as células na parede do frasco precisam ser digeridas com tripsina e depois colhidas. O tempo de digestão deve ser controlado durante o uso da pancreatina.
A tripsina é uma protease heterogênea, que pode degradar a proteína na membrana celular e nos frascos de cultura celular. Ao degradar a proteína em um local específico, a proteína na junção entre as proteínas é degradada e as células tornam-se esféricas devido à tensão de seu citoesqueleto interno, separando assim as células. O grau de digestão da tripsina é um passo fundamental na cultura de células: os detritos celulares excessivamente digeridos aumentam, a espuma preta aumenta, as células caem em pedaços, o que afeta seriamente a viabilidade celular, e algumas células flutuam e perdem com a tripsina descartada; digestão Insuficiente, as células são difíceis de serem expelidas da parede do frasco, a pipetagem repetida também prejudica a viabilidade celular.
Diferentes tecidos ou células reagem de forma diferente à ação da pancreatina. A atividade das células dispersas de pancreatina também está relacionada à sua concentração, temperatura e tempo de ação. Quando o pH é 8,0 e a temperatura é 37, a capacidade de ação da solução de pancreatina é relativamente forte. Ao usar pancreatina, a concentração, a temperatura e o tempo devem ser controlados para evitar danos às células causados por superdigestão. Como Ca2+, Mg2+, soro e proteína podem reduzir a atividade da pancreatina, deve-se usar BSS sem Ca2+ e Mg2+ ao preparar a solução de pancreatina, como a solução de D-Hanks. Ao terminar a digestão, use meio de cultura contendo soro ou inibidor de tripsina para interromper o efeito da pancreatina nas células.
Além disso, se for uma célula recém-comprada, você pode primeiro usar uma baixa concentração de tripsina para descobrir a digestão tempo, e observe se as células são redondas a cada minuto e faça um registro. Em suma, ao colher as células no frascos de cultura celular, o tempo de digestão da tripsina deve ser controlado para manter a viabilidade celular.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.