English
Pasaż komórkowy odnosi się do procesu dzielenia hodowli na małe części, ponownego wysiewu w innym naczyniu hodowlanym, a następnie hodowli. Kolby do hodowli komórkowych są powszechnym materiałem eksploatacyjnym w procesie pasażowania, więc jakie są konkretne etapy pasażowania komórek?
1. Wyjmij kolby z kulturą komórkową z inkubatora, spryskaj powierzchnię butelki 75% alkoholem za pomocą puszki z alkoholem i przenieś na stół ultraczysty.
2. Otwórz pokrywkę, delikatnie zaaspiruj starą pożywkę hodowlaną, dodaj odpowiednią ilość buforu PBS, aby przemyć 1-2 razy pipetą Pasteura i wyrzuć bufor PBS.
3. Za pomocą pipety dodaj 1-2 ml pankreatyny i potrząśnij „krzyżykiem”, aby pankreatyna w pełni zetknęła się z komórkami.
4. Przenieś kolbę z kulturą komórkową z trypsyną na stolik odwróconego mikroskopu i obserwuj pod mikroskopem trawienie komórek. Kiedy komórki stają się okrągłe i odpadają w dużych ilościach, przygotuj się na zakończenie trawienia. Spryskaj powierzchnię butelki 75% alkoholem i przenieś ją do super Net Taiwan.
5. Użyj pipety (lub pipety Pasteura), aby dodać równą ilość podłoża zawierającego surowicę, aby zakończyć trawienie. Dokładnie odpipetuj, aby komórki całkowicie odpadły.
6. Przenieś zmieszany płyn w butelce do probówki wirówkowej, zrównoważ ją i wiruj przez około 5 minut.
7. Po odwirowaniu spryskaj powierzchnię probówki wirówkową puszką z alkoholem, przenieś ją na ultraczysty stół, otwórz pokrywkę i wlej supernatant do zbiornika na odpady.
8. Dodać odpowiednią objętość pożywki zawierającej surowicę i delikatnie pipetować za pomocą pipety lub pipety Pasteura, aby uzyskać zawiesinę komórek.
9. Podziel zawiesinę komórek do 2 (lub więcej) czystych, sterylnych kolb hodowlanych, dodaj odpowiednią ilość pożywki hodowlanej i zamknij pokrywkę.
10. Umieścić porcjowaną kolbę hodowlaną na stoliku mikroskopu odwróconego i obserwować stan komórek. Liczba komórek powinna być zagwarantowana. Zbyt mała liczba wpłynie na wzrost.
11. Oznacz butelkę, aby wskazać czas przejścia, typ komórki, operatora i inne informacje. Przed umieszczeniem go w inkubatorze ponownie spryskaj powierzchnię korpusu butelki alkoholem, oczyść stół operacyjny, przetrzyj powierzchnię ultra czystego stołu 75% alkoholem i wyczyść odpadki i śmieci.
The powyżej jest specyficzny proces używania kolby do hodowli komórkowych do pasażowania komórek. Należy pamiętać, że podczas pracy należy nosić sterylne ubrania, sterylne rękawiczki i maski oraz zwracać uwagę na aseptyczne operacje podczas całego procesu, aby uniknąć zanieczyszczenia komórek.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.