English
Subkultura odnosi się do procesu dzielenia kultury na małe części, ponownego zaszczepiania ich do innego naczynia hodowlanego (butelki), a następnie hodowania. Kolby do hodowli komórek są powszechnie używanymi materiałami eksploatacyjnymi podczas hodowli komórek. Jak więc przeprowadzić subkulturę komórek w kolbie?
Zazwyczaj komórki w butelkach do hodowli komórek rosną w gęstą monowarstwę i są zasadniczo nasycone. Aby komórki mogły dalej się rozmnażać i zwiększać liczbę komórek, konieczne jest przeprowadzenie operacji pasażu. Zawieszone komórki można oddzielić bezpośrednio, podczas gdy komórki przylegające muszą zostać wytrawione, zanim będą mogły zostać oddzielone. Ogólnie rzecz biorąc, enzymy proteolityczne (takie jak trypsyna) są używane do trawienia komórek przylegających na pojedyncze komórki. W celu poprawy trawienia można również dodać kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA). Obserwuj komórki, aż staną się okrągłe i odkleją się od ścianki butelki. Ten proces często zajmuje 5-15 minut. Aby uniknąć tworzenia się grudek komórek, nie należy stukać w butelki z kulturą komórkową podczas procesu trawienia komórek.
W przypadku szczególnie trudnych do strawienia komórek można dodać roztwór trawiący z trypsyną EDTA i umieścić komórki w temperaturze 37°C w ułatwiają trawienie. Po oddzieleniu komórek od ścianki butelki, natychmiast dodaj pełną pożywkę zawierającą surowicę, aby zatrzymać trawienie. Niektóre białka w surowicy mogą hamować działanie trzustki. Aktywność enzymatyczna. Generalnie wirowanie nie jest konieczne. Jeśli komórki wymagają pożywki bez surowicy lub pożywki o niskiej zawartości surowicy, wiruj przy 125000 g przez 5 minut, a następnie wyrzuć przerwaną pożywkę, dodaj odpowiednią nową pożywkę i delikatnie wymieszaj komórki przed przesiewem.
Stosunek pasażowania komórek wynosi na ogół 1:2 -1:20, w zależności od typu komórki. W procesie pasażowania trypsyna uszkodzi błonę komórkową niektórych komórek. Możesz użyć skrobaka do komórek, aby delikatnie zeskrobać komórki, dodać odpowiednią ilość pożywki, delikatnie pipetować, aby wymieszać komórki i przenieść je do nowej kolby hodowlanej.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.