English
Hodowla komórkowa obejmuje inokulację komórek, hodowlę, zbieranie i inne procesy. Komórki w kolby do hodowli komórek urosły do pewnego stopnia i trzeba je zebrać. W tym czasie komórki na ściankach kolby muszą zostać strawione trypsyną, a następnie zebrane. Podczas stosowania pankreatyny należy kontrolować czas trawienia.
Trypsyna jest heterogeniczną proteazą, która może degradować białko na błonie komórkowej i butelkach do hodowli komórkowych. Poprzez degradację białka w określonym miejscu, białko na połączeniu między białkami ulega degradacji, a komórki stają się kuliste z powodu napięcia ich wewnętrznego cytoszkieletu, tym samym oddzielając komórki. Stopień trawienia trypsyną jest kluczowym etapem w hodowli komórkowej: wzrasta ilość nadmiernie strawionych szczątków komórkowych, wzrasta ilość czarnej szumowiny, komórki odpadają na kawałki, co poważnie wpływa na żywotność komórek, a niektóre komórki unoszą się i tracą wraz z odrzuconą trypsyną; Niewystarczające trawienie, komórki są trudne do wydmuchania ze ścianek butelki, wielokrotne pipetowanie również uszkadza żywotność komórek.
Różne tkanki lub komórki reagują różnie na działanie pankreatyny. Aktywność rozproszonych komórek pankreatyny jest również związana z jej stężeniem, temperaturą i czasem działania. Gdy pH wynosi 8,0, a temperatura 37, zdolność działania roztworu pankreatyny jest stosunkowo silna. Podczas stosowania pankreatyny należy kontrolować stężenie, temperaturę i czas, aby uniknąć uszkodzenia komórek spowodowanego nadmiernym trawieniem. Ponieważ Ca2+, Mg2+, surowica i białko mogą zmniejszać aktywność pankreatyny, do przygotowania roztworu pankreatyny, np. roztworu D-Hanksa, należy stosować BSS bez Ca2+ i Mg2+. Kończąc trawienie, użyj podłoża hodowlanego zawierającego surowicę lub inhibitora trypsyny, aby zatrzymać wpływ pankreatyny na komórki.
Ponadto, jeśli jest to nowo zakupiona komórka, możesz najpierw użyć niskiego stężenia trypsyny, aby sprawdzić trawienie czasu i obserwuj, czy komórki są okrągłe co minutę i dokonaj zapisu. Krótko mówiąc, podczas zbierania komórek w kolby do hodowli komórek, czas trawienia trypsyną musi być kontrolowany tak, aby utrzymać żywotność komórek.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.