Kif tikkontrolla l-ħin tad-diġestjoni tat-tripsin fil-garafini tal-kultura taċ-ċelluli

Wed May 18 12:10:38 CST 2022

Il-kultura taċ-ċelluli tinvolvi l-inokulazzjoni taċ-ċelluli, il-kultivazzjoni, il-ħsad u proċessi oħra. Iċ-ċelloli fil-Flasks tal-kultura taċ-ċelluli kibru sa ċertu punt u ċ-ċelloli jeħtieġ li jinħasdu. F'dan iż-żmien, iċ-ċelloli fuq il-ħajt tal-flask jeħtieġ li jiġu diġeriti bit-trypsin u mbagħad maħsuda. Il-ħin tad-diġestjoni għandu jkun ikkontrollat ​​waqt l-użu tal-pankreatin.

Trypsin hija protease eteroġenja, li tista 'tiddegrada l-proteina fuq il-membrana taċ-ċellula u l-garafini tal-kultura taċ-ċelluli. Billi tiddegrada l-proteina f'post speċifiku, il-proteina fil-junction bejn il-proteini tiġi degradata, u ċ-ċelloli jsiru sferiċi minħabba t-tensjoni taċ-ċitoskeletru intern tagħhom, u b'hekk jisseparaw iċ-ċelloli. Il-grad ta 'diġestjoni tat-tripsin huwa pass ewlieni fil-kultura taċ-ċelluli: id-debris taċ-ċelluli diġerit b'mod eċċessiv jiżdied, iż-żidiet tal-ħmieġ iswed, iċ-ċelloli se jaqgħu f'biċċiet, li jaffettwa serjament il-vijabbiltà taċ-ċelluli, u xi ċelluli float u jitilfu bit-tripsin mormi; diġestjoni Insuffiċjenti, iċ-ċelluli huma diffiċli biex jinżlu mill-ħajt tal-flixkun, il-pipettar ripetut se jagħmel ħsara wkoll lill-vijabbiltà taċ-ċelluli.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Tessuti jew ċelloli differenti jirreaġixxu b'mod differenti għall-azzjoni tal-frixa. L-attività taċ-ċelloli mxerrda tal-pankreatin hija wkoll relatata mal-konċentrazzjoni, it-temperatura u l-ħin ta 'azzjoni tagħha. Meta l-pH huwa 8.0 u t-temperatura hija 37, l-abbiltà ta 'azzjoni tas-soluzzjoni tal-frixa hija relattivament qawwija. Meta tuża l-frixa, il-konċentrazzjoni, it-temperatura u l-ħin għandhom jiġu kkontrollati biex tiġi evitata ħsara taċ-ċelluli kkawżata minn diġestjoni żejda. Minħabba li Ca2+, Mg2+, serum u proteina jistgħu jnaqqsu l-attività tal-frixa, BSS mingħajr Ca2+ u Mg2+ għandhom jintużaw meta tiġi ppreparata soluzzjoni tal-pankreatin, bħal soluzzjoni D-Hanks. Meta ttemm id-diġestjoni, uża medja ta' kultura li fiha s-serum jew inibitur tat-tripsin biex twaqqaf l-effett tal-pankreatin fuq iċ-ċelloli.

Barra minn hekk, jekk tkun ċellula li għadha kif inxtrat, l-ewwel tista' tuża konċentrazzjoni baxxa ta' trypsin biex issir taf id-diġestjoni ħin, u osserva jekk iċ-ċelloli humiex tondi kull minuta u agħmel rekord. Fil-qosor, meta jinħasdu ċ-ċelloli fil-Flasks tal-kultura taċ-ċelluli, il-ħin tad-diġestjoni tat-trypsin għandu jiġi kkontrollat ​​sabiex tinżamm il-vijabbiltà taċ-ċelluli.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.