English
Il-batterji lisoġeniċi jirreferu għal batterji li għandhom profagi integrati fuq il-kromożomi tagħhom u jistgħu jikbru u jirriproduċu b'mod normali mingħajr ma jiġu lisati. Batterjofagi ħfief intużaw ħafna fl-oqsma tat-trasduzzjoni, il-vettori tal-inġinerija ġenetika u l-bijoloġija molekulari. Il-Flask tal-kultura taċ-ċelluli jista 'jintuża biex jiċċekkja l-lisoġeniċità tal-batterja. Il-metodu tat-tħaddim speċifiku huwa kif ġej:
1. Kultura ta 'batterji lisoġeniċi: Inokula E. coli 225 (λ) attivat mill-inklinazzjoni LB fi flask tal-kultura taċ-ċelluli ta' 250ml li jkun fih 20ml soluzzjoni ta 'kultura LB, kultura b'ċaqliq fi 30°C għal 16-il siegħa, u mbagħad ħu 2ml sospensjoni batterjali minnha u qabbadha ma' ieħor Fi flixkun Erlenmeyer ta' 250ml li jkun fih 20ml ta' brodu LB, kultiva bi tħawwad f'37°C għal 2h għal fażi logaritmika.
2. Eskludi phage ħieles: Jekk ir-razza li trid tiġi ttestjata hija Bacillus, tista 'ssir f'sospensjoni ta' spori, u mbagħad ittrattata f'80 °C għal 10 minuti biex joqtol il-fagi li jista 'jiġi adsorbit u ħieles fuq il-wiċċ tal-batterja lisoġenika; jekk ir-razza li trid tiġi ttestjata mhix Bacillus , Uża antiserum ippreparat minn phage jew 0.2% ta 'soluzzjoni ta' ċitrat tas-sodju biex taħsel iċ-ċelluli tal-lysogen tal-fażi log biex tneħħi l-fagi adsorbit fil-wiċċ u ħieles. Wara ċ-ċentrifugazzjoni f'4000r/min għal 10 minuti, is-supernatant jista 'jiġi miżjud b'batterji indikaturi sensittivi għad-determinazzjoni tal-pjanċa b'saff doppju, li tintuża biex tittestja l-fagi ħieles tal-kampjun u l-faġi li jassorbi l-batterja lisoġenika. Il-fagi wara ċ-ċentrifugazzjoni Iċ-ċelloli huma indotti.
3. Induzzjoni ta 'batterji lisoġeniċi: il-batterji miġbura wara ċ-ċentrifugazzjoni jinħaslu darbtejn b'salina normali sterili, u jsiru f'konċentrazzjoni finali ta' 1011 ċelluli/ml b'salina normali jew 100mmol/l buffer Tris-HCL (pH7.0) Għal sospensjoni batterjali, żid 5ml ta 'sospensjoni batterika għal kull dixx, irradja b'lampa UV ta' 30W f'distanza ta '30cm għal 30s, immedjatament żid 5ml ta' soluzzjoni ta 'kultura LB b'konċentrazzjoni doppja, ħallat sew u inkuba fid-dlam f'37°C għal 2h.
4. Spezzjoni ta 'razez lisoġeniċi: Opera skond il-metodu ta' agar b'saff doppju, żid ftit qtar ta 'kloroform mal-lisat indott ta' hawn fuq, u ħallat b'mod xieraq bil-metodu ta 'dilwizzjoni ta' 10 darbiet. Wara li tagħżel it-tliet dilwizzjonijiet tad-dilwizzjoni, ħu 0.3ml għal kull dilwizzjoni. Ħallat sew ma '0.2ml ta' sospensjoni ta 'batterji E. coli 226 sensittivi għall-fażi logaritmika, imbagħad żid mezz ta' nofs il-ġisem LB li jkun ġie mdewweb u mkessaħ għal 45 ° C, ħawwad immedjatament, u mbagħad ferragħha fuq il-pjanċa medja solida LB. Wara s-solidifikazzjoni, 37 Inkuba f'℃ għal 6h u osserva. Jekk għadd kbir ta 'plakki jidhru fuq il-pjanċa kkultivata, jipprova li r-razza ttestjata hija lisoġenu.
Biex tivverifika jekk il-batterji għandhomx lisoġeniċità, segwi l-passi ta' hawn fuq. Oqgħod attent għall-isterilità tal-proċess waqt it-tħaddim biex tevita tħaddim mhux xieraq li jaffettwa r-riżultati tat-test.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.