English
Il-liżi taċ-ċelluli hija metodu sperimentali importanti biex tibdel il-permeabilità u l-attività taċ-ċelluli. Ifisser li wara li ċellola tiġi infettata minn virus, il-virus juża n-nutrijenti fiċ-ċellula ospitanti biex jissintetizza l-frieħ tiegħu stess, u mbagħad il-frieħ tal-virus jeqred iċ-ċellula ospitanti u jinħeles 'il barra miċ-ċelloli. Fl-esperimenti tal-liżi taċ-ċelluli, Flasks tal-kultura taċ-ċelluli huma konsumabbli komuni. Il-passi għall-liżi taċ-ċelluli huma kif ġej:
1. Ferra l-mezz tal-kultura, u bokkla l-flixkun tal-kultura taċ-ċelluli rasu 'l isfel fuq karta assorbenti sabiex il-karta assorbenti tassorbi l-medju tal-kultura (jew poġġi l-flixkun wieqfa għal xi żmien biex tippermetti li l-mezz tal-kultura residwu jgħaddi lejn il-qiegħ tal-flixkun u mbagħad uża pipetta biex terdaha bogħod ).
2. Żid 3ml ta '4℃ PBS imkessaħ minn qabel (0.01M pH7.2～7.3) ma' kull flixkun ta 'ċelluli. Poġġi ċ-ċelloli ċatti u ħawwad bil-mod għal 1 min biex taħsel iċ-ċelloli, u mbagħad armi s-soluzzjoni tal-ħasil. Irrepeti l-operazzjoni ta 'hawn fuq darbtejn, aħsel iċ-ċelloli tliet darbiet biex taħsel il-fluwidu tal-kultura. Armi l-PBS u poġġi l-garafina tal-kultura fuq is-silġ.
3. Żid 10ul PMSF (100mM) għal 1ml lysis buffer, ħawwad sew u poġġi fuq is-silġ. (PMSF għandu jitħawwad sakemm ma jkunx hemm kristalli qabel ma jitħallat mas-soluzzjoni tal-liżi.)
4. Żid 400ul ta’ lysis buffer li jkun fih PMSF ma’ kull flixkun ta’ ċelluli, u lyse fuq is-silġ għal 30 minuta. Sabiex iċ-ċelluli jiġu liżi bis-sħiħ, il-garafina trid titħawwad ta' spiss.
5. Wara liżi, uża barraxa nadifa biex tobrox iċ-ċelloli fuq naħa waħda tal-flask tal-kultura (l-azzjoni għandha tkun veloċi), u mbagħad uża pistola biex tmexxi d-debris taċ-ċelluli u lisat għal tubu ċentrifugu ta '1.5ml. (L-operazzjoni kollha għandha ssir fuq is-silġ kemm jista 'jkun.)
6. Iċċentrifuga f'12000 rpm f'4°C għal 5 min. (Ixgħel iċ-ċentrifuga bil-quddiem biex tiksaħ minn qabel)
7. Ittrasferixxi s-supernatant ċentrifugat ġo tubu ċentrifugu għal 0.5 min u aħżen f'-20 ° C.
Flasks tal-kultura taċ-ċelluli mhux biss jintużaw għal esperimenti ta 'liżi taċ-ċelluli, iżda wkoll għal ċelluli fuq skala medja u kultura tat-tessuti fil-laboratorju, bħal ċelloli Vero , Ċelloli HEK 293, ċelluli CAR-T, ċelluli CHO, ċelluli tal-insetti, eċċ.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.